[發明專利]一種鼠免疫狀態監測試劑及其制備方法有效
| 申請號： | 200710031075.6 | 申請日： | 2007-10-26 |
| 公開（公告）號： | CN101149371A | 公開（公告）日： | 2008-03-26 |
| 發明（設計）人： | 孫爾維;蔣澤生;高毅;潘明新;王海瀾;袁小澎;馬聰 | 申請（專利權）人： | 南方醫科大學珠江醫院 |
| 主分類號： | G01N33/49 | 分類號： | G01N33/49;G01N15/00 |
| 代理公司： | 廣州市天河廬陽專利事務所 | 代理人： | 胡濟元 |
| 地址： | 510282廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 免疫 狀態 監測 試劑 及其 制備 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種鼠免疫狀態監測試劑，該試劑是經CFSE染色的兩種近交系的鼠脾細胞的PBS懸液，其中兩種鼠脾細胞的總濃度為0.5～1×108個/ml，二者的比例為1∶1，熒光染色濃度差為1∶20。
2.權利要求1所述的免疫狀態監測試劑的制備方法，該方法由以下步驟組成：
1)分別取兩種近交系的鼠脾細胞，用PBS懸浮并調整細胞濃度，得到兩種濃度均為107個/mL的細胞懸液；
2)將濃度為10mM的CFSE的二甲亞砜溶液以50倍的PBS稀釋后得200μM?CFSE工作液；
3)往步驟1所得的一種細胞懸液中加入步驟2所得的CFSE工作液，使CFSE的終濃度為0.3μM，往步驟1所得的另一種細胞懸液中加入步驟2所得的CFSE工作液，使CFSE終濃度為6μM，然后在溫度為37℃下孵育染色15～20分鐘；
4)分別收集步驟3所得的細胞懸液中的染色細胞，用0.01M的4℃PBS洗滌2～3次后重懸于PBS；
5)按細胞數1∶1的比例混合步驟4所的兩種染色細胞懸液，并用PBS調整細胞總濃度為0.5～1×108個/mL，即可。
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