[發明專利]IL－12表達載體及該載體表達的真核細胞株及應用有效
| 申請號： | 200710028952.4 | 申請日： | 2007-07-02 |
| 公開（公告）號： | CN101200730A | 公開（公告）日： | 2008-06-18 |
| 發明（設計）人： | 粟寬源;柴玉波;劉勇;李鼎峰;夏書奇;曾振飛 | 申請（專利權）人： | 廣州市愷泰生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/63 | 分類號： | C12N15/63;C12N15/24;C12N15/85;C12N5/10;A61K38/20 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 510000廣東省廣州*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | il 12 表達 載體 真核細胞 應用 | ||
1.一種制備rhIL-12的表達載體，其特征在于：
(1)該載體包含人IL-12的一個或兩個p35基和一個p40基的轉錄本；
(2)p35亞基、p40亞基分別由各自的啟動子控制，啟動子包括CMV、SV40、MMTV；
(3)p35亞基表達單元含有增強其表達的相應調控元件Intron和SV40?Enhancer；
(4)p35亞基表達單元在載體中與p40亞基串聯；
(5)p40亞基和抗性篩選標記neo基因之間引入調控neo基因表達的IRES元件。
2.如權利要求1所述的表達載體，其特征在于：載體為兩個p35亞基和一個p40亞基的轉錄本；啟動子為CMV；兩個p35亞基串聯于p40基之前。
3.如權利要求1所述的表達載體，其特征在于：載體的表達單元結構為啟動子-亞基-啟動子-亞基。
4.如權利要求3所述的表達載體，其特征在于：載體的表達單元結構為如下核酸序列：SV40?Enhancer-pCMV-Intron-p35-SV40Enhancer-pCMV-Intron-p35-pCMV-p40-IRES-neo。
5.一種高效表達人IL-12真核細胞株，其特征在于：是在CHO、COS或MDCK哺乳動物細胞系中制備出來的，所述細胞含有權利要求1所述的載體，或者所述細胞已用權利要求4所述的核酸序列轉染。
6.如權利要求5所述的高效表達人IL-12真核細胞株，其特征在于：哺乳動物細胞系為CHO細胞系。
7.一種生產權利要求5所述高效表達人IL-12真核細胞株的方法，其特征在于：包括利用權利要求5所述宿主細胞表達人IL-12，并分離這種蛋白質。
8.權利要求7所生產的人IL-12，其在制備藥物中的應用。
9.一種藥物組合物，其特征在于，其包含權利要求7所述人IL-12和藥學上可接受的載體。
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