[發明專利]一種蜂膠藥材的鑒別方法及蜂膠藥材產區的初步分類方法

有效

• 申請號: 200710028678.0
• 申請日: 2007-06-19
• 公開（公告）號: CN101327224A
• 公開（公告）日: 2008-12-24
• 發明（設計）人: 林勵;王小平;鄭堯隆;潘建國;盧占列
• 申請（專利權）人: 廣州市寶生園有限公司;廣州中醫藥大學
• 主分類號: A61K35/64
• 分類號: A61K35/64;G01N30/02;G01N30/86;G06F19/00
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1.一種蜂膠藥材的鑒別方法，包括如下步驟：

(1)、建立蜂膠的指紋圖譜；

(a)供試品溶液的制備：分別取多批蜂膠藥材粉末，精密稱定，置索氏提取器中，用丙酮索氏提取至提取液無色，提取液水浴蒸干，殘渣用甲醇溶解，置容量瓶中，甲醇定容至刻度，為供試品溶液；

(b)對照品溶液的制備：分別精密稱定蘆丁、槲皮素、白楊素、高良姜素對照品適量，用流動相稀釋，制成對照品溶液；

(c)色譜條件：色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，流動相為：A：甲醇，B：酸水；采用梯度洗脫方式；流速1.0mL/min；檢測波長：283nm；柱溫：20-30℃；采用梯度洗脫方式：0min→10min→20min→30min→35min→50min→60min→120min，甲醇：35％→35％→45％→45％→50％→50％→55％→55％，0.4％的磷酸水：65％→65％→55％→55％→50％→50％→45％→45％；

(d)測定：分別精確吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，分別注入高效液相色譜儀中，照高效液相色譜法進行試驗，以對照品為參照物，測定并記錄色譜圖，得到蜂膠HPLC指紋圖譜；

(2)、以上述相同的方法測定楊樹膠等假蜂膠的指紋圖譜；

(3)、所述蜂膠指紋圖譜共有29個共有峰，與楊樹膠等假蜂膠的指紋圖譜對比，從峰高及其大小排序的差別比較可以看出：19號共有峰和21號共有峰的峰高及其大小排序等參數反映出楊樹膠和蜂膠的差別，因此，RT＝66.61min的19號共有峰和RT＝78.37min的21號共有峰共同形成了樹膠和蜂膠相互區別的特征峰；

(4)、以上述相同的方法測定待測樣品的指紋圖譜；

(5)、將待測蜂膠樣品指紋圖譜與蜂膠的指紋圖譜對比，篩選符?合蜂膠標準指紋圖譜的蜂膠藥材。

2.根據權利要求1所述的蜂膠藥材的鑒別方法，其特征在于所述蜂膠供試品溶液的具體制備過程為：分別取多批蜂膠藥材粉末約1g，精密稱定，置索氏提取器中，用丙酮100ml，索氏提取至提取液無色，提取液水浴蒸干，殘渣用甲醇溶解，置100ml量瓶中，甲醇定容至刻度，為供試品溶液。

3.根據權利要求1所述的蜂膠藥材的鑒別方法，其特征在于所述色譜條件為：色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，流動相為：

A：甲醇，B：0.4％的磷酸水；柱溫：25℃。

4.根據權利要求1或2所述的蜂膠藥材的鑒別方法，其特征在于：

(a)共有峰保留時間與蜂膠指紋圖譜不存在明顯差別，也不存在獨有峰，并有明顯白楊素RT＝88.76min的25號共有峰，重點鑒別圖譜中的19號和21號共有峰，19號共有峰峰高值達不到第十大峰，21號共有峰峰高值達不到第三大峰為真蜂膠；而19號共有峰峰高值達到第四大峰，同時21號共有峰峰高值達到第一大峰者為楊樹膠。

(b)、共有峰保留時間與蜂膠指紋圖譜存在明顯差別者，屬于其他類樹膠或其他假蜂膠。

5.根據權利要求1或2所述的蜂膠藥材鑒別方法，其特征在于：所述29個共有峰的相對保留時間的相對標準偏差RSD均小于3％，其中11號共有峰的蘆丁的平均相對保留時間RT為29.5min，相對標準偏差RSD為0.23％；16號共有峰的槲皮素的平均相對保留時間RT為46.3min，相對標準偏差RSD為0.95％；25號共有峰的白楊素的平均相對保留時間RT為88.8min，相對標準偏差RSD為1.6％，27號共有峰的高良姜素的平均相對保留時間RT為98.0min，相對標準偏差RSD為2.0％。?