[發(fā)明專(zhuān)利]化妝品中氫化可的松的高效液相色譜檢測(cè)方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710027922.1
• 申請(qǐng)日: 2007-05-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101169395A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-04-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭偉東
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 廣東省保化檢測(cè)中心有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02;G01N30/88;G01N30/60;G01N30/74;G01N30/08
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• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明是一項(xiàng)利用高效液相色譜儀檢測(cè)化妝品中禁用成分--氫化可的松(Hydrocortisone)的新技術(shù)，尤其適用于化妝品中氫化可的松的定性及定量分析。

背景技術(shù)

氫化可的松屬于糖皮質(zhì)激素類(lèi)藥物，具有抗菌、消炎的作用。國(guó)家衛(wèi)生部頒布的2002年版《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》規(guī)定，化妝品中不得添加氫化可的松。氫化可的松由于其廣譜高效的殺菌作用，被添加到祛痘類(lèi)產(chǎn)品以達(dá)到消炎、祛痘、除螨及抗粉刺的目的。但這類(lèi)藥物的不良反應(yīng)較多，如：體重增加、下肢浮腫、紫紋、易出血傾向、創(chuàng)口愈合不良、肱或股骨頭缺血性壞死、骨質(zhì)疏松或骨折、肌無(wú)力、肌萎縮、低血鉀綜合征、胃腸道刺激(惡心、嘔吐)、胰腺炎、消化性潰瘍或腸穿孔，兒童生長(zhǎng)受到抑制、青光眼、白內(nèi)障、良性顱內(nèi)壓升高等綜合征。長(zhǎng)期使用添加有氫化可的松的化妝品或皮膚性接觸此種藥物可嚴(yán)重影響人體健康。

目前關(guān)于氫化可的松檢測(cè)的文獻(xiàn)報(bào)道大都是針對(duì)氫化可的松原料和藥品中氫化可的松的檢測(cè)方法，主要有熒光光度法、分光光度法、褶合光譜法、雙波長(zhǎng)分光光度法、三波長(zhǎng)分光光度法、薄層色譜法、高效液相色譜法等。熒光光度法雖然靈敏度高，但反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng)，操作繁瑣；分光光度法呈色反應(yīng)的時(shí)間和溫度影響較大，致使方法的重復(fù)性較差；褶合光譜法、雙波長(zhǎng)分光光度法、三波長(zhǎng)分光光度法容易受基質(zhì)成分的干擾；薄層色譜法可以用來(lái)進(jìn)行定性檢測(cè)，不適用于定量檢測(cè)；高效液相色譜方法是近幾年檢測(cè)氫化可的松較常用的方法，但也僅僅局限于原料藥和各種藥品制劑中含量的檢測(cè)，由于藥品組分較少，基質(zhì)簡(jiǎn)單，干擾因素較少，且樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單目標(biāo)檢測(cè)物損失小，因此藥品中氫化可的松的含量容易檢測(cè)。而化妝品、飼料、肉類(lèi)中的氫化可的松含量的檢測(cè)國(guó)家還沒(méi)有制定相關(guān)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和方法，并且到目前為止化妝品中氫化可的松的檢測(cè)也沒(méi)有相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道。與藥品不同，化妝品種類(lèi)繁多有膏、霜、乳、粉、水、啫喱、凝膠等多種劑型，并且基質(zhì)復(fù)雜，各成分的理化性質(zhì)差別較大，干擾因素較多，尤其是氫化可的松作為化妝品禁用成分添加到化妝品中，其含量較低，用上述的熒光光度法、分光光度法、薄層色譜法等光學(xué)分析方法很難準(zhǔn)確的檢測(cè)出化妝品中微量的氫化可的松成分。因此，針對(duì)現(xiàn)有氫化可的松檢測(cè)技術(shù)上的不足，我們?cè)O(shè)計(jì)了一種用高效液相色譜方法檢測(cè)化妝品中氫化可的松的方法，該方法操作簡(jiǎn)單，專(zhuān)屬性好，靈敏度高，且適宜化妝品中氫化可的松的微量檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種檢測(cè)化妝品中氫化可的松的分析方法，該項(xiàng)技術(shù)利用高效液相色譜儀不僅可以對(duì)化妝品中的氫化可的松進(jìn)行準(zhǔn)確的定性分析，而且還可以進(jìn)行微量的定量分析。

本發(fā)明是用一定濃度的甲醇-鹽酸混合液或乙腈-鹽酸混合液提取化妝品中的氫化可的松，然后將提取液過(guò)濾，濾除固體雜質(zhì)，直至濾液澄清，取制備好的樣液上機(jī)，用甲醇-水溶液或乙腈-水溶液進(jìn)行洗脫分離。所用高效液相色譜儀的主要配置包括十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的C18柱或C8柱、二極管陣列檢測(cè)器或紫外檢測(cè)器。

本發(fā)明方法的主要分析步驟如下：

1樣品預(yù)處理

稱(chēng)取一定量的化妝品(乳、膏、霜或水劑)于10ml刻度離心管中，加入4-7ml提取液(甲醇∶0.01～1.00mol/ml鹽酸＝20～80％∶80～20％或乙腈∶0.01～1.00mol/ml鹽酸＝20～80％∶80～20％)，渦旋混勻使基質(zhì)充分分散，定容至刻度，再超聲提取15-30min，將提取液轉(zhuǎn)移至Eppendorf管中冰浴30min使基質(zhì)析出，12000rpm/min離心5min，如果有必要可以再用0.45μm濾膜過(guò)濾。

2色譜條件

(1)色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的反相色譜柱C18或C8柱；

(2)檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器；

(3)檢測(cè)波長(zhǎng)：選用190-380nm波長(zhǎng)作為檢測(cè)波長(zhǎng)；

(4)流動(dòng)相：采用甲醇∶水＝20～80％∶80～20％或乙腈∶水＝20～80％∶80～20％混合液作為流動(dòng)相，平衡色譜柱約20min，使基線(xiàn)平穩(wěn)，該條件下保留時(shí)間適合，峰形對(duì)稱(chēng)，分離度好(R＞1.5)。

(5)流速：0.5～1.5ml/min；

(6)柱溫：15～35℃。

3濃度計(jì)算方法

用氫化可的松標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制成一定梯度濃度的標(biāo)準(zhǔn)液，取20μl進(jìn)樣，按外標(biāo)法，以峰面積-濃度作線(xiàn)性回歸，得出線(xiàn)性回歸方程，利用該方程和樣品中氫化可的松的峰面積計(jì)算樣品中的氫化可的松含量。

4樣品檢測(cè)