[發明專利]轉Bt基因甘蔗對螟蟲抗性的快速鑒定方法無效
| 申請號： | 200710027302.8 | 申請日： | 2007-03-27 |
| 公開（公告）號： | CN101113977A | 公開（公告）日： | 2008-01-30 |
| 發明（設計）人： | 鄧海華;翁麗星;黎教良;徐金玲;李奇偉;汪聯輝;張瓊;陳仲華;沈萬寬;陳海寧;勞方業;楊湛端 | 申請（專利權）人： | 廣州甘蔗糖業研究所;翁麗星;徐金玲;汪聯輝 |
| 主分類號： | G01N33/00 | 分類號： | G01N33/00 |
| 代理公司： | 廣州市紅荔專利代理有限公司 | 代理人： | 唐弟 |
| 地址： | 510316廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | bt 基因 甘蔗 螟蟲 抗性 快速 鑒定 方法 | ||
1.一種轉Bt基因甘蔗對螟蟲抗性的快速鑒定方法，其特征在于包括如下步驟：
A.溫室桶栽甘蔗；
B.蟲源選擇，以初孵化的條螟幼蟲為試驗蟲源；
C.人工接蟲，將步驟B的蟲源人工接蟲到步驟A的桶栽甘蔗上；
D.抗性評價，經步驟C的人工接蟲5天后調查結果，根據幼蟲的成活率、甘蔗的受害程度綜合評價參試甘蔗品系的抗蟲性；
其中步驟B中對同一批待評價的轉Bt基因甘蔗品系的試驗蟲源為同一頭條螟雌蛾所產卵的初孵幼蟲。
2.一種轉Bt基因甘蔗對螟蟲抗性的快速鑒定方法，其特征在于包括如下步驟：
A.溫室桶栽甘蔗；
B.蟲源選擇，以初孵化的條螟幼蟲為試驗蟲源；
C.人工接蟲，將步驟B的蟲源人工接蟲到步驟A的桶栽甘蔗上；
D.抗性評價，經步驟C的人工接蟲5天后調查結果，根據幼蟲的成活率、甘蔗的受害程度綜合評價參試甘蔗品系的抗蟲性；
其中步驟B中對同一批待評價的轉Bt基因甘蔗品系的試驗蟲源為將2～3頭條螟雌蛾產的初孵幼蟲分別平均分配到每株待測蔗株。
3.如權利要求1或2所述的轉Bt基因甘蔗對螟蟲抗性的快速鑒定方法，其特征在于步驟B中獲得試驗蟲源的步驟如下：
B1.在蔗田采集甘蔗條螟的蛹，置于盒內，在室內條件下羽化，讓雌、雄蛾自然交配；
B2.選擇成功交配后的雌蛾，放入透明的塑料瓶內，每瓶1頭雌蛾，待其產卵后4天內，用剪刀或小刀將卵塊連同塑料瓶壁逐一取下，在體視鏡下計算每塊卵粒數，并將卵塊置于放有吸水紙的培養皿內保濕。
4.如權利要求3所述的轉Bt基因甘蔗對螟蟲抗性的快速鑒定方法，其特征在于步驟C中人工接蟲時間的確定：發現卵中有小黑點時，即做好接蟲的準備，有幼蟲孵化時立即開始接蟲。
5.如權利要求1或2所述的的轉Bt基因甘蔗對螟蟲抗性的快速鑒定方法，其特征在于：
步驟A中，在溫室內桶栽培育待進行抗螟性鑒定的轉Bt基因甘蔗品系及其受體品種，每桶下種4個蔗芽，成苗后每桶留苗2～4株；選擇株高1～1.5米的甘蔗作為試驗的適宜株齡；
步驟C中，將初孵的幼蟲按計劃接蟲的數量接至每株試驗甘蔗的心葉部，每株甘蔗的心葉接上10頭初孵條螟幼蟲，接蟲持續時間為1～2天；
步驟D中，接蟲第2天后觀察心葉的受害狀，5天后調查幼蟲的生存情況和蔗株受害程度，按“抗蟲蔗株條螟侵害程度分級標準”評定參試品系的抗性級別。
6.如權利要求5所述的的轉Bt基因甘蔗對螟蟲抗性的快速鑒定方法，其特征在于：
步驟C中，要求同一試驗的每株甘蔗同一天接入相同數量的來自同一雌蛾的初孵幼蟲。
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