[發明專利]硫酸銨梯度法－薄膜蒸發法制備鹽酸小檗堿長循環脂質體的方法

無效

• 申請號: 200710025536.9
• 申請日: 2007-08-03
• 公開（公告）號: CN101108167A
• 公開（公告）日: 2008-01-23
• 發明（設計）人: 安學勤;朱琨
• 申請（專利權）人: 南京師范大學
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K31/4375;A61K47/24
• 代理公司: 南京知識律師事務所
• 代理人: 栗仲平

1.一種硫酸銨梯度法-薄膜蒸發法制備鹽酸小檗堿長循環脂質體的方法，步驟如下：

1).將蛋黃卵磷脂，以及1/3蛋黃卵磷脂質量的膽固醇，以及1/20-1/5蛋黃卵磷脂質量的聚乙二醇2000溶于適量無水乙醇中，形成黃色透亮溶液；

2).減壓回收乙醇，在容器壁形成膜；注入硫酸銨溶液，使得膜材溶解；水化1h～2h；

3).以蒸餾水為透析介質，透析15～20h，制造硫酸銨梯度，得空白脂質體；

4).在空白脂質體中加入鹽酸小檗堿溶液；

5).在30℃～60℃孵化10～60分鐘；

6).取孵化后的溶液，以蒸餾水為透析外液，在4℃～37℃溫度下透析12h，透析到外液無色透明；把透析液轉移至容量瓶中定容，即可獲得包封率高，穩定，粒徑均勻的長循環脂質體。

2.按照權利要求1所述的硫酸銨梯度法-薄膜蒸發法制備鹽酸小檗堿長循環脂質體的方法，其特征在于，

所述的孵化溫度和時間為：60℃下孵化10分鐘；

所述的硫酸銨溶液的濃度分別是1.0ml.l^-1～2.5ml.l^-1；硫酸銨溶液的加入量為25ml硫酸銨溶液/50～500mg?EPC；

所述的透析溫度為4℃。

3.按照權利要求1或2或3所述的硫酸銨梯度法-薄膜蒸發法制備鹽酸小檗堿長循環脂質體的方法，其特征在于，具體操作步驟是：

1).用50ml三角燒瓶稱取50～500mg蛋黃卵磷脂，以及1/3蛋黃卵磷脂量的膽固醇，以及1/20-1/5蛋黃卵磷脂質量的聚乙二醇2000溶于適量乙醇中，若難溶，可加熱和超聲波處理使其溶解，形成黃色透亮溶液；

2).在旋轉蒸發儀減壓回收乙醇，直至無醇味，在燒瓶壁形成膜，注入25ml?2.5ml·l^-1的硫酸銨溶液，適當超聲，使得膜材溶解，水化1h～2h；

3).把溶液裝入透析袋，以蒸餾水為透析介質，透析15～20h制造硫酸銨梯度，最后得空白脂質體；

4).取5ml的空白脂質體將其轉移至50ml三角燒瓶中，加入5ml的1mg·l^-1-2mg·l^-1的鹽酸小檗堿溶液；

5).在60℃孵化10分鐘；

6).取1～2ml轉移至透析袋中，以蒸餾水為透析外液，于4℃下透析12h，每3h換一次透析液，需直至透析到外液無色透明，把透析液轉移至100ml容量瓶中定容，測紫外吸光度，根據標準曲線算出包封率。