[發明專利]抗幽門螺桿菌感染的尿素酶表位融合肽脂質體疫苗

無效

• 申請號: 200710022485.4
• 申請日: 2007-05-22
• 公開（公告）號: CN101062015A
• 公開（公告）日: 2007-10-31
• 發明（設計）人: 吳梧桐;趙文鋒;徐旭東
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K39/116;A61K39/106;A61P31/04;A61P1/04;C12N15/62
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.抗幽門螺桿菌感染的尿素酶表位融合肽脂質體疫苗，其特征在于該疫苗是將幽門螺桿菌尿素酶B亞單位表位與黏膜佐劑霍亂毒素B亞單位融合后的融合蛋白包被于脂質體內而形成的載藥脂質體。

2.按照權利要求1所述的脂質體疫苗，其特征在于該疫苗使用了幽門螺桿菌尿素酶B亞單位表位與黏膜佐劑霍亂毒素B亞單位的融合肽作為免疫原，該融合肽結構為幽門螺桿菌尿素酶B亞單位表位連接在黏膜佐劑霍亂毒素B亞單位的碳未端。

3.按照權利要求1和2所述的脂質體疫苗，其特征在于使用了幽門螺桿菌尿素酶B亞單位表位，該表位的氨基酸序列為CHHLDKSIKEDVQFADSRI。

4.幽門螺桿菌尿素酶B亞單位表位與黏膜佐劑霍亂毒素B亞單位的融合肽表達質粒，該質?；诖竽c桿菌表達質粒pET-28a構建，融合肽的編碼序列插入在質粒pET-28a的NcoI和XhoI位點，可以在大腸桿菌BL21(DE3)細胞內經IPTG誘導后表達幽門螺桿菌尿素酶B亞單位表位與霍亂毒素B亞單位的融合肽。

5.幽門螺桿菌尿素酶B亞單位表位與黏膜佐劑霍亂毒素B亞單位的融合肽的制備方法，融合肽表達質粒轉化大腸桿菌BL21(DE3)細胞，并通過IPTG誘導后提取包涵體，經洗滌、復性和DEAE?Sepharose?FF陰離子交換層析純化后，可得到純度為95.6％的融合肽。

6.按照權權利要求4和5所述制備的融合肽，其特征在于可以誘導免疫系統產生特異性抗幽門螺桿菌尿素酶B亞單位的血清IgG和黏膜IgA抗體，可單獨用于疫苗或與藥物載體或其它成分組合制成藥物組合物，或用于生產出能夠有效地防止幽門螺桿菌附著的抗體藥物。

7.抗幽門螺桿菌感染的尿素酶表位融合肽脂質體疫苗的制備方法，通過逆向蒸發法將幽門螺桿菌尿素酶B亞單位表位與黏膜佐劑霍亂毒素B亞單位的融合肽包被于脂質體，可以獲得包封率71.4％，粒徑分布在100-500nm，分散均勻的球形或楕球形脂質體。

8.按照權權利要求4、5、6和7制備的脂質體疫苗，其特征在于誘導免疫系統產生特異性抗幽門螺桿菌尿素酶B亞單位的血清IgG和黏膜IgA抗體，可明顯抑制幽門螺桿菌在胃內的定植，還可以明顯降低已經在胃內定植的幽門螺桿菌的細菌量，可以用作抗幽門螺桿菌疫苗，或用于生產出能夠有效地防止幽門螺桿菌附著的抗體藥物。