[發(fā)明專利]由玉米漿發(fā)酵－酶催化法合成7－氨基－3－脫乙酰氧基頭孢烷酸有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 200710021342.1 | 申請(qǐng)日： | 2007-04-09 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN101285089A | 公開(kāi)（公告）日： | 2008-10-15 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 胡曉;王玉成;李桂根;王靜康;王理想;王友志;趙紅;周偉軍;王圣良;李維泉;王健;周平江;路一飛 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 徐州瑞賽科技實(shí)業(yè)有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12P33/00 | 分類號(hào)： | C12P33/00;C12R1/465 |
| 代理公司： | 暫無(wú)信息 | 代理人： | 暫無(wú)信息 |
| 地址： | 221007江蘇省*** | 國(guó)省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 玉米 發(fā)酵 催化 合成 氨基 乙酰 頭孢 | ||
1、一種由玉米漿發(fā)酵-酶催化法合成7-氨基-3-脫乙酰氧基頭孢烷酸(7-ADCA)的方法，包括：
(1)用帶有擴(kuò)環(huán)酶基因的棒狀鏈霉菌，對(duì)玉米漿進(jìn)行菌株轉(zhuǎn)化，在培養(yǎng)基中發(fā)酵實(shí)現(xiàn)擴(kuò)環(huán)，并與加入培養(yǎng)基中的苯乙酸作用，生成苯乙?；?7-氨基-3-脫乙酰氧基頭孢烷酸。
(2)通過(guò)有機(jī)溶劑萃取和水反萃取，獲得苯乙?；?7-氨基-3-脫乙酰氧基頭孢烷酸的水溶液。
(3)在水反萃取的溶液中加入乙酰轉(zhuǎn)移酶，脫除側(cè)鏈制得7-氨基-3-乙酰氧基頭孢烷酸。
(4)使用有機(jī)溶劑萃取酶催化脫酰后的水溶液，經(jīng)結(jié)晶和重結(jié)晶獲得7-ADCA。
2、根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中(1)擴(kuò)環(huán)酶來(lái)自帶棒鏈霉菌(Streptomycesclavuligerus)。
3、根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中(2)步的有機(jī)溶劑是：乙酸丁酯，或乙酸乙酯，或二氯甲烷。萃取為pH2.3～4.6的酸性溶液，有機(jī)溶劑與發(fā)酵液的體積比為1∶5～15。水反萃取為pH7.4～8.9的堿性溶液，水與生化反應(yīng)液的體積比為10～5∶1。
4、根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中(3)中乙酰轉(zhuǎn)移酶為IPA-750，是通過(guò)培養(yǎng)大腸桿菌基因工程菌和固定化菌。
5、根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中(4)步使用的有機(jī)溶劑是：乙酸丁酯，或乙酸乙酯，或二甲烷。重結(jié)晶使用的為組合有機(jī)溶劑：乙酸乙酯+石油醚，配比為1∶3～5。
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