[發(fā)明專利]一種腫瘤血管新生體外共培養(yǎng)模型

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710019214.3
• 申請日: 2007-01-04
• 公開（公告）號: CN101157908A
• 公開（公告）日: 2008-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 丁義濤;方勝;余德才;孫喜太
• 申請（專利權(quán)）人: 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院
• 主分類號: C12N5/06
• 分類號: C12N5/06;C12N5/08;C12N11/04
• 代理公司: 南京中新達專利代理有限公司
• 代理人: 孫鷗

1.一種腫瘤血管新生體外共培養(yǎng)模型，其步驟如下：

(1)取腫瘤細胞充分混勻于2％海藻酸鈉溶液中；

(2)通過微囊發(fā)生器，將細胞混懸液噴入100mmol/L氯化鈣溶液內(nèi)使其膠化；

(3)待微膠珠硬化，生理鹽水洗滌；

(4)與0.1％多聚賴氨酸溶液反應(yīng)后，生理鹽水洗滌；

(5)再與0.15％海藻酸鈉溶液反應(yīng)后，生理鹽水洗滌；

(6)用55mmol/L的檸檬酸鈉溶液液化微囊核心后，置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

(7)微囊化腫瘤細胞直接用于共培養(yǎng)，或凍存；

(8)取內(nèi)皮細胞貼壁培養(yǎng)或三維生長，加入微囊化腫瘤細胞于同一培養(yǎng)液中，共培養(yǎng)。

(9)分離腫瘤細胞與內(nèi)皮細胞，分別行基因和蛋白檢測以及培養(yǎng)液細胞因子的檢測。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種腫瘤血管新生體外共培養(yǎng)模型，其特征在于控制截流量為小于110KD，微囊內(nèi)細胞密度為10⁵～10⁶個細胞/ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種腫瘤血管新生體外共培養(yǎng)模型，其特征在于步驟(8)中，內(nèi)皮細胞與微囊內(nèi)腫瘤細胞比例為1∶10。