[發明專利]一種組織工程化骨復合體及應用

無效

• 申請號: 200710016803.6
• 申請日: 2007-07-09
• 公開（公告）號: CN101085374A
• 公開（公告）日: 2007-12-12
• 發明（設計）人: 趙冬梅;王海斌;劉軍莉;趙萍;赫淑倩;霍延青;司海朋
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: A61L27/40
• 分類號: A61L27/40;A61L27/38
• 代理公司: 濟南圣達專利商標事務所
• 代理人: 李健康

1.一種組織工程化骨復合體，其特征是：所述骨復合體由呈多孔狀且孔徑間貫通的人工骨支架及植入孔中的轉染有血管內皮細胞生長因子基因的骨髓間充質干細胞組成；其中，所述人工骨支架由質量比為6～7∶4～3的納米羥基磷灰石與羧甲基殼聚糖制成，其孔隙率為65％～75％，孔徑尺寸2微米～600微米，以圓形為主；所述骨髓間充質干細胞是人骨髓間充質干細胞ATCC?NO.CRL-2496或兔骨髓間充質干細胞；所述血管內皮細胞生長因子基因是人基因VEGF165或兔基因VEGF165。

2.如權利要求1所述組織工程化骨復合體，其特征是：所述人工骨支架由質量比為3：2的納米羥基磷灰石與羧甲基殼聚糖制成，其孔隙率為70％～75％，孔徑尺寸200微米～450微米；所述骨髓間充質干細胞是兔骨髓間充質干細胞；所述血管內皮細胞生長因子基因是兔基因VEGF165。

3.如權利要求1或2所述組織工程化骨復合體，其特征是：所述兔骨髓間充質干細胞由下述方法分離與培養：

體重1.5±0.3kg新西蘭大白兔，無菌條件下抽取其髂骨骨髓3±0.5ml，DME/F-12培養液沖洗，離心1000r×5min，棄上清液，DME/F-12培養液重懸制成單細胞懸液；血球計數板計數，以5×10⁵個/ml密度接種于50ml玻璃細胞培養瓶中，37℃、5％?CO₂恒溫培養箱中培養，24h～48h后倒置顯微鏡下觀察；0.25％胰酶消化原代細胞3min，以1×10⁵個/ml按1:2比例傳代接種培養；取部分細胞以1×10³個/ml接種于24孔培養板中，每天隨機取3個孔細胞，血球計數板計數，以細胞數為縱標，天數為橫標繪制細胞生長曲線。

4.權利要求1或2所述組織工程化骨復合體作為骨缺損修復材料的應用。