[發明專利]海參多肽、多糖的綜合提取工藝

無效

• 申請號: 200710014734.5
• 申請日: 2007-04-28
• 公開（公告）號: CN101191139A
• 公開（公告）日: 2008-06-04
• 發明（設計）人: 付學軍;金海珠;王洪濤
• 申請（專利權）人: 付學軍
• 主分類號: C12P21/00
• 分類號: C12P21/00;C12P19/04
• 代理公司: 煙臺信合專利代理有限公司
• 代理人: 遲元香

技術領域

本發明涉及海洋生物的開發應用技術領域，具體地講是海參多肽、多糖的綜合提取工藝。

背景技術

近年來，隨著國內外運用現代科學技術對海參品種鑒定與分類，海參的生理與生化，海參生物活性物質的分離、鑒定及其生物醫學作用等研究的不斷深入，人們發現海參含有許多具有重要生物學活性的物質，如多肽、海參多糖、海參皂苷、海參毒素等。現代營養學研究表明，低分子肽可不經胃消化直接被腸粘膜吸收。此外，海參肽還具有抗腫瘤、降血壓、抗疲勞、延緩衰老、提高免疫力等功效。海參多糖具有提高免疫力、抑制腫瘤、抗凝血、保護神經組織等多種生理功能。從海參各類生物活性物質中尋找和開發新藥，以及加工功能性食品已經成為海參深度開發利用的重要方向。目前，有采用化學法水解海參蛋白、也有采用酶解法，都是通過一步水解法進行單獨海參多肽或者海參多糖的提取，上述方法只能得到一種海參活性物質(或海參多肽或海參多糖)，其它有效的海參活性物質在提取的同時被浪費掉，并且得到的海參多肽為多種分子量混合的物質，因為具有活性的海參肽通常為二肽、三肽等小分子肽，其中的大分子量的海參肽不利于吸收；另外化學法水解海參蛋白在提取海參活性物質的同時容易產生有毒物質。

發明內容

本發明的目的是克服上述已有技術的不足，而提供一種海參多肽、多糖的綜合提取工藝，主要解決了現有的提取工藝只能獲得單一的海參活性物質、且多肽中含有大分子量的多肽及化學法水解海參蛋白易產生有毒物質的問題。

為了達到上述目的，本發明是這樣實現的：海參多肽、多糖的綜合提取工藝，其特殊之處在于它包括如下步驟：

a選取鮮海參為原料，洗凈除去泥沙及內臟，放入超低溫冰箱速凍4-5小時，切成塊狀后放入絞肉機絞碎，然后放入膠體磨中研磨使成膠體化；

b將膠體化狀態的海參50-60℃下加熱20-30分鐘；

c將經過上述前處理的海參加入全自動水解反應器，加入去離子水和復合胰蛋白酶，去離子水的量為清洗去內臟的鮮海參重量的5-7倍，進行水解；

d水解結束后高溫滅菌滅酶；

e取出水解液離心去除沉淀及不溶物，加入乙醇至體系乙醇體積分數為60％，靜止12h后離心，上清液為水溶性海參多肽的混合物；

f合并水解離心沉淀物和加入乙醇后離心沉淀物，加入去離子水混合配成水溶液，加入A.S1398精制中性蛋白酶進一步水解；

g取出上述步驟水解液離心去除沉淀及不溶物，加入乙醇至體系乙醇體積分數為60％，靜止12h后離心，上清液為海參多肽的混合物并與e步驟水解離心上清液合并，沉淀為粗多糖；

h將合并的上清液——海參多肽的混合物利用旋轉蒸發器濃縮，冷凍干燥得粉末多肽混合物；

i將上述粉末多肽混合物配制成5％的水溶液，用不同孔徑超濾膜進行分級分離，脫苦脫色，真空濃縮后冷凍干燥得到溶解性良好的不同分子量段的海參多肽粉末；

j將g步驟的粗多糖配成質量百分比為5～7％的水溶液，離心除去不溶性雜質，上清液用雙氧水氧化脫色，加入乙酸鉀冷藏過夜，離心收集沉淀；

k沉淀經去離子水洗滌，配制成質量百分比為30％水溶液，經48小時透析，加入乙醇作為沉淀劑，乙醇與水體積比為8∶2，至少重復沉淀三次得精制海參多糖。

本發明的海參多肽、多糖的綜合提取工藝，步驟a所述的超低溫冰箱的溫度為-70℃。

本發明的海參多肽、多糖的綜合提取工藝，步驟c所述的復合胰蛋白酶的量(8000U/g)為清洗去內臟的鮮海參重量的1.0％，酶解溫度50℃，水解時間2h。

本發明的海參多肽、多糖的綜合提取工藝，步驟f所述的去離子水的量為合并的沉淀物重量的3倍，A.S1398精制中性蛋白的量(13萬U/g)為合并的沉淀物重量的1.0％，溫度為30℃，水解時間為3小時。

本發明的海參多肽、多糖的綜合提取工藝，所述的乙醇為95％乙醇。