[發(fā)明專利]一種枯草芽孢桿菌脂肽類(lèi)抗菌物質(zhì)的分離提取方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710012540.1
• 申請(qǐng)日: 2007-08-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101372502A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-02-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李旭;張惠文;蘇振成;張成剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院沈陽(yáng)應(yīng)用生態(tài)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C07K1/16
• 分類(lèi)號(hào): C07K1/16;C12P21/00;C12R1/125
• 代理公司: 沈陽(yáng)科苑專利商標(biāo)代理有限公司
• 代理人: 許宗富;周秀梅

1.一種枯草芽孢桿菌脂肽類(lèi)抗菌物質(zhì)的分離提取方法，其特征在于：將枯草芽孢桿菌發(fā)酵液的粗提物經(jīng)Sephadex?G-25柱層析，用去離子水進(jìn)行洗脫，收集具有抗啤酒酵母活性的洗脫峰，經(jīng)Sephadex?G-25柱收集的洗脫峰再通過(guò)Sephadex?G-100柱層析，用去離子水進(jìn)行洗脫，收集具有抗啤酒酵母活性的洗脫峰，所得物質(zhì)通過(guò)質(zhì)譜檢測(cè)，即為7種脂肽類(lèi)抗菌物質(zhì)。

2.按權(quán)利要求1所述的分離提取方法，其特征在于：所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液粗提物為：將發(fā)酵的枯草芽孢桿菌液以6000-8000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，取上清液并加入發(fā)酵的枯草芽孢桿菌液2-3倍體積的丙酮，0-4℃沉淀12小時(shí)；而后再以11000-14000轉(zhuǎn)/分鐘離心10-20分鐘收集上清，所得上清液經(jīng)40-60℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原發(fā)酵液體積的5-10％，冷凍干燥后即得發(fā)酵液粗提物，待用。

3.按權(quán)利要求1所述的分離提取方法，其特征在于：所述Sephadex?G-25柱層析是將待用的枯草芽孢桿菌發(fā)酵粗提物經(jīng)Sephadex?G-25層析柱層析，用去離子水進(jìn)行洗脫，流速為0.15-0.2mL/min，收集具有抗啤酒酵母活性的洗脫峰，所得洗脫峰冷凍干燥，待用。

4.按權(quán)利要求1所述的分離提取方法，其特征在于：所述SephadexG-100柱層析是將經(jīng)Sephadex?G-25層析柱層析收集的物質(zhì)，再經(jīng)Sephadex?G-100層析柱純化，用去離子水進(jìn)行洗脫，流速為0.15-0.2mL/min，收集具有抗啤酒酵母活性的洗脫峰，所得洗脫峰冷凍干燥，待用。