[發明專利]乳酸菌的一種高密度培養方法

無效

• 申請號: 200710004941.2
• 申請日: 2007-02-13
• 公開（公告）號: CN101245324A
• 公開（公告）日: 2008-08-20
• 發明（設計）人: 丁之銓;林愛玉
• 申請（專利權）人: 丁之銓;林愛玉
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/38;C12R1/225;C12R1/25
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及乳酸菌的一種高密度培養方法，屬于微生物發酵工程領域。

背景技術

乳酸菌是人和動物正常微生物群或區系的組成部分。由于其特殊的生理功能被廣泛應用于食品、醫藥及飼料等許多行業上。乳酸菌是生產發酵乳制品、泡菜、干酪、發酵香腸等傳統發酵食品，賦予其特殊質地、風味和口感的重要微生物菌群；乳酸菌在家畜飼養和飼料中有重要的作用，特別是在青貯飼料的發酵過程中起主導作用，能夠有效地改善青貯飼料的發酵品質，提高動物的生產性能。

乳酸菌菌劑的活性與其數量密切相關，因此為推進其應用，最關鍵的是解決菌劑的高密度培養問題。由于乳酸菌生長的營養要求較高，需要一些特殊的營養組分；同時，乳酸菌在生長過程中分泌有機酸類代謝產物，使培養液中的pH值不斷下降，當pH值降至4.10以下時，菌體的生長繁殖就會受到抑制，因此采用傳統的菌種生產工藝，菌種質量得不到保證，而且生產成本高。高密度培養技術廣泛地應用于各種微生物的生產中，它是指采用一定的工藝技術，保證微生物生長的適宜條件，延長微生物的指數增殖過程，從而得到高濃度的細胞。乳酸菌的高密度培養增加了單位體積培養液中的菌體數量，降低了生產成本，從而提高產品在市場上的競爭力。對于加速乳酸菌制劑的商品化進程，更好地滿足市場需求，具有重要的意義。

發明內容

本發明提供了乳酸菌的一種高密度培養技術，通過使用專門的培養基(以下稱乳酸菌培養基)，其基礎配方包括：3％大豆蛋白胨、2％酵母浸提粉、0.5％乙酸鈉、復合微量元素液、復合維生素液等，并在培養過程中流加堿以調節培養液的pH值，延長乳酸菌對數生長期，獲得高活性、高濃度的培養液，培養液中乳酸菌活菌數達到9.0×10⁹-1.0×10¹⁰cfu/ml。培養的乳酸菌可應用于飼料青貯、乳制品接種、其它食品添加劑(如奶酪制作、葡萄酒脫酸)及醫用等。

具體實施方式

本發明以植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌、乳酸片球菌為菌種，經常規方法活化后、接種于乳酸菌培養基，調節起始pH值為7.0-7.2；在培養過程中流加堿使培養液的pH值穩定在6.0-6.8。

實施例1：

挑取活化的植物乳桿菌于MRS液體培養基中，37℃培養12h，以6％的接種量接種到含乳酸菌培養基的發酵罐中，培養基起始pH值為7.0，當pH值低于6.6時流加30％Na₂CO₃溶液，保持培養液pH值穩定在6.7±0.1，37℃培養30h。

實施例2：

挑取活化的植物乳桿菌于MRS液體培養基中，37℃培養12h，以6％的接種量接種到含乳酸菌培養基的發酵罐中，培養液起始pH值為7.0，當pH值低于6.6時流加20％NaOH溶液，保持培養液pH值穩定在6.7±0.1，37℃培養30h。

實施例3：

挑取活化的保加利亞乳桿菌于MRS液體培養基中，37℃培養12h，以10％的接種量接種到含乳酸菌培養基的發酵罐中，培養液起始pH值為7.2，當pH值低于6.0時流加20％KOH溶液，保持培養液pH值穩定在6.2±0.2。42℃培養24h。

實施例4：

挑取活化的保加利亞乳桿菌于MRS液體培養基中，37℃培養12h，以10％的接種量接種到含乳酸菌培養基的發酵罐中，培養液起始pH值為7.2，當pH值低于6.0時流加氨水，保持培養液pH值穩定在6.2±0.2。42℃培養24h。

實施例5：

挑取活化的乳酸片球菌于MRS液體培養基中，32℃培養12h，以6％的接種量接種到含乳酸菌培養基的發酵罐中，培養液起始pH值為7.2，當pH值低于6.4時流加30％Na₂CO₃溶液，保持培養液pH值穩定在6.5±0.1，32℃培養30h。