[發明專利]淀粉吸附區域及其用途

無效

• 申請號: 200680056250.0
• 申請日: 2006-10-31
• 公開（公告）號: CN101605809A
• 公開（公告）日: 2009-12-16
• 發明（設計）人: 張大慈;呂平江;孫玉珠;許嘉欽
• 申請（專利權）人: 善笙生物科技股份有限公司
• 主分類號: C07K14/37
• 分類號: C07K14/37;C07K1/22;C12P19/14;C12N9/30;C12N15/62;C12N15/66
• 代理公司: 北京連和連知識產權代理有限公司
• 代理人: 賀小明

1.一種淀粉吸附區域，其特征在于具有如下顯示于SEQ?ID?No.1、2或3的氨基酸序列；

SEQ?ID?No.1：

ASIPSSASVQ?LDSYNYDGST?FSGKIYVKNI?AYSKKVTVVYADGSDNWNNN?GNIIAASFSG?PISGSNYEYW?TFSASVKGIKEFYIKYEVSG?KTYYDNNNSA?NYQVSTS；

SEQ?ID?No.2：

ASIPSSASVQ?LDSYNYDGST?FSGKIYVKNI?AYSKKVTVIYADGSDNWNNN?GNTIAASYSA?PISGSNYEYW?TFSASINGIKEFYIKYEVSG?KTYYDNNNSA?NYQVSTS；或

SEQ?ID?No.3：

ASIPSSASVQ?LDSYNYDGST?FSGKIYVKNI?AYSKKVTVIYANGSDNWNNN?GNTIAASYSA?PISGSNYEYW?TFSASINGIKEFYIKYEVSG?KTYYDNNNSA?NYQVSTS；

或其SEQ?ID?NO.1、2或3的等位變體和衍生物，其具有淀粉結合能力者。

2.根據權利要求1所述的淀粉吸附區域，其特征在于其可取得自CBM20或CBM21。

3.根據權利要求2所述的淀粉吸附區域，其特征在于其可取得自CBM21葡萄糖淀粉酶之淀粉吸附區域。

4.根據權利要求3所述的淀粉吸附區域，其特征在于其可取得自根霉屬。

5.根據權利要求4所述的淀粉吸附區域，其特征在于其可取得自根霉屬葡萄糖淀粉酶的淀粉吸附區域。

6.根據權利要求5所述的淀粉吸附區域，其特征在于其在氨基酸序列的殘基32、47、58、67、83、93和94的芳香性基團上具有用于碳水化合物結合的活性位點。

7.根據權利要求6所述的淀粉吸附區域，其特征在于該氨基酸殘基為酪氨酸或/及色氨酸。

8.根據權利要求6所述的淀粉吸附區域，其特征在于該活性位點為殘基32酪氨酸、殘基47色氨酸、殘基58酪氨酸、殘基83酪氨酸、殘基93酪氨酸和殘基94酪氨酸。

9.一重組蛋白質，其特征在于包含下列序列：

(SBD)m-Ln-X-L’p-(SBD)q

SBD指淀粉吸附區域，L指連接子，L’指連接子，X指目標蛋白質或多勝肽，m為0、1或2，n為0或1，p為0或1，q為0、1或2，其中m和q不會同時為0。

10.根據權利要求9所述的蛋白質，其特征在于該淀粉吸附區域系如權利要求1的淀粉吸附區域。

11.根據權利要求9所述的蛋白質，其特征在于該連接子為RoLK：Rhizopus?oryzae?GA的連接子；PH：六個組氨酸；PK：八個賴氨酸；PPT：一個蘇氨酸及四個脯氨酸-蘇氨酸重復序列[T(PT)₄]；或58L：在載體pET39b(+)上界于限制酶切位SpeI及NcoI間的區域。

12.一復合物，其特征在于包含下列序列：

(SBD)m-X-(SBD)q

SBD指淀粉吸附區域，X指碳水化合物，m為0、1或2，q為0、1或2，其中淀粉吸附區域利用不同部位同時和碳水化合物結合。

13.根據權利要求12所述的復合物，其特征在于該碳水化合物的結構包含α-1，4-葡萄糖鍵接或α-1，6-葡萄糖鍵接。

14.根據權利要求12所述的復合物，其特征在于該碳水化合物為環狀碳水化合物。

15.根據權利要求12所述的復合物，其特征在于該淀粉吸附區域和碳水化合物用配體結合位置或構型方式結合。

16.根據權利要求12所述的復合物，其特征在于該淀粉吸附區域包含多個單位依據碳水化合物的大小決定。

17.一種用以純化含有如權利要求1淀粉吸附區域的重組蛋白質的方法，其特征在于包含：

a.將含有重組蛋白質的生物液體直接施加于親和性基質；和

b.調整溫度、pH值、離子強度、含糖濃度或酵素組成以溶離重組蛋白質。