[發明專利]制備κ-角叉菜聚糖酶的方法

有效

• 申請號: 200680054085.5
• 申請日: 2006-08-29
• 公開（公告）號: CN101415722A
• 公開（公告）日: 2009-04-22
• 發明（設計）人: 雅斯閔·納杰姆丁·克哈姆布哈提;卡爾帕納·哈瑞西·莫迪;布哈瓦納斯·杰哈
• 申請（專利權）人: 科學和工業研究委員會
• 主分類號: C07K1/34
• 分類號: C07K1/34;C07K14/21;C12N9/42
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 楊 青;樊衛民

發明領域：

本發明涉及制備κ-角叉菜聚糖酶的方法。更具體來說，本發明涉 及通過使用登記號為MTCC5261的耐鹽海洋革蘭氏陰性細菌假單胞菌 (Pseudomonas?sp.)制備角叉菜聚糖酶的方法。

發明背景和現有技術：

κ-角叉菜聚糖酶的可能應用是獲得低分子量碳水化合物、用于大 型海藻消化、通過控制紅藻水華形成防止生物淤積、獲得精細化學品 以及用于藻類生物技術。

角叉菜聚糖是從紅藻綱(Rhodophyceae)某些種類的紅色海藻獲 得的天然成分(Greer，C.W.，和W.Yaphe.1984.Enzymatic?analysis?of carrageenans：Structure?of?carrageenan?from?Eucheuma?nudum.(角叉菜聚 糖的酶法分析：來自松葉麒麟菜的角叉菜聚糖的結構)Hydrobiologia. 116/117：563-567)。角叉菜聚糖是線性多糖，由被稱為A殘基的1，3 位連接的β-D-吡喃半乳糖和被稱為B殘基的通過1，4位連接的α-D-吡 喃半乳糖的重復的二糖序列構成。角叉菜聚糖與瓊脂的區別在于角叉 菜聚糖中的B單元是D型的，而在瓊脂中它們是L型的。角叉菜聚糖 基本結構中的規則骨架被或多或少有序分布的硫酸半酯基團所打斷。 角叉菜聚糖也可以含有一些甲氧基和丙酮酸基團。角叉菜聚糖的普通 來源是角叉菜屬(Chondrus)、麒麟菜屬(卡帕藻屬)(Eucheuma (Kappaphycus))、杉藻屬(Gigartina)和銀杏藻(Iridaea)的物種。

有三種基本類型的角叉菜聚糖可用。從角叉菜屬、麒麟菜屬和杉 藻屬物種獲得的Kappa(κ)、iota(ι)和lambda(λ)角叉菜聚糖，它們的 不同在于硫酸酯取代的數量和位置。κ和ι-角叉菜聚糖在K⁺、Ca⁺²或 NH₄⁺的存在下形成熱可逆的凝膠，但是在Na⁺型中不形成凝膠。

在β-1，4連接處降解角叉菜聚糖的水解酶被稱為角叉菜聚糖酶。已 經從不同的海洋細菌中分離到了三種類型的酶，即κ、ι和λ-角叉菜聚糖 酶。它們都是裂解角叉菜聚糖的β-1，4鍵產生新角叉菜二糖系列產物的 內切水解酶(Michel，G.，L?Chantlat，E.Fanchon，B.Henrissat，B.Kloareg， 和O.Didweberg.2001.Theι-carrageenase?of?Alteromonas?fortis.(強 壯交替單胞菌的ι-角叉菜聚糖酶)Journal?of?Biological?Chemistry. 276(43)：40202-40209)。κ-角叉菜聚糖酶在未來幾年中有大規模的應 用和工業需求(Ostgaard，K.，B.F.Wangen，S.H.Knutsen，和I.M.Aasen. 1993.Large?scale?production?and?purification?of?κ-carrageenase?from Pseudomonas?carrageenovora?for?applications?in?seaweed?biotechnology. (從食角叉菜假單胞菌大規模生產和純化κ-角叉菜聚糖酶用于海藻生 物技術)Enzyme?and?Microbial?Technology.15(4)：326-333)。