[發明專利]含有CG二核苷酸修飾的Toll樣受體的新合成拮抗劑

無效

• 申請號: 200680053058.6
• 申請日: 2006-12-19
• 公開（公告）號: CN101378776A
• 公開（公告）日: 2009-03-04
• 發明（設計）人: 埃坎巴·R·坎迪馬拉;馬里卡朱納·雷迪帕塔;李玉魁;拉克什米·巴加特;朱富剛;薩迪爾·阿格拉沃爾
• 申請（專利權）人: 艾德拉藥物股份有限公司
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所
• 代理人: 封新琴;巫肖南

相關申請

本申請要求2005年12月20日提交的美國臨時申請流水號60/752,335和 2006年8月4日提交的美國臨時申請流水號60/821,458的權益。以提述的方 式將上述申請教導的全部內容并入本文。

發明背景

發明領域

本發明一般性地涉及使用寡核苷酸作為免疫調節劑的免疫和免疫治療應 用領域。更具體而言，本發明涉及新的化學組合物和使用它們的方法。這些 化合物可通過TLR9介導的免疫應答有效地產生獨特的細胞因子/趨化因子譜 (cytokine/chemokine?profile)。

相關領域概述

根據應答中涉及的細胞的亞群不同，免疫應答包括先天性和適應性應答。 例如，經典的細胞介導的功能，例如遲發型超敏反應和細胞毒性T淋巴細胞 (CTL)活化中涉及的T輔助(Th)細胞是Th1細胞；而充當B細胞活化輔助細 胞的Th細胞是Th2細胞。免疫應答的類型受到響應于抗原接觸而產生的細 胞因子的影響。由Th1和Th2細胞分泌的細胞因子的差異可能是這兩種亞群 不同的生物功能所導致的。

Th1細胞參與身體對抗原(例如病毒感染、細胞內病原體和腫瘤細胞)的先 天性應答。結果導致IL-2和IFN-γ的分泌并且伴隨著CTL的活化。已知Th2 細胞響應于細菌和寄生物而活化，可以通過分泌IL-4和IL-5來介導身體的適 應性免疫應答(例如IgE的產生和嗜酸性粒細胞的活化)。

例如，在哺乳動物中，可以通過引入細菌或含有非甲基化CpG二核苷酸 的合成DNA來誘導Th1免疫應答，這種免疫應答是特異性的寡核苷酸序列(例 如非甲基化的CpG)被呈遞給特定免疫細胞上的受體的結果，所述受體稱作模 式識別受體(PRRs)。這些PRR中的某一些是Toll-樣受體(TLRs)。

Toll-樣受體(TLRs)與先天性免疫應答有緊密的關聯。在脊椎動物中，已 知一個包含十種蛋白的稱為Toll-樣受體(TLRs)的家族識別病原體相關性分子 圖式。在這十種蛋白之中，已知TLR3、7、8和9定位于細胞內的內體中， 識別核酸(DNA和RNA)和小分子，如核苷和核酸代謝物。已知TLR3和TLR9 分別識別存在于病毒DNA和細菌DNA和合成DNA中的核酸如dsRNA和非 甲基化的CpG二核苷酸。已經表明細菌DNA活化免疫系統和抗腫瘤活性 (Tokunaga?T?et?al.，J.Natl.Cancer?Inst.(1984)72:955-962；Shimada?S，et?al.，Jpn. H?cancer?Res，1986，77，808-816；Yamamoto?S，et?al.，Jpn.J.Cancer?Res.，1986， 79，866-73)。使用含有CpG二核苷酸的反義寡核苷酸的其它研究已經顯示刺 激了免疫應答(Zhao?Q，et?al.，Biochem.Pharmacol.1996，26，173-82)。后續的研 究顯示了TLR9識別存在于細菌DNA和合成DNA中的非甲基化的CpG基序 (Hemmi?H，Takeuchi?O，Kawai?T，Kaisho?T，Sato?S，Sanjo?H，Matsumoto?M， Hoshino?K，Wagner?H，Takeda?K，Akira?S.A?Toll-like?receptor?recognizes bacterial?DNA.Nature.(2000)；408:740-5)。對含有CpG的硫代磷酸酯寡核苷酸 的其它修飾也可影響它們通過TLR9作為免疫應答調節劑發揮功能的能力(參 見，例如Zhao?et?al.，Biochem.Pharmacol.(1996)51:173-182；Zhao?et?al.， Biochem?Pharmacol.(1996)52:1537-1544；Zhao?et?al.，Antisense?Nucleic?Acid Drug?Dev.(1997)7:495-502；Zhao?et?al.，Bioorg.Med.Chem.Lett.(1999) 9:3453-3458；Zhao?et?al.，Bioorg.Med.Chem.Lett.(2000)10:1051-1054；Yu?et al.，Bioorg.Med.Chem.Lett.(2000)10:2585-2588；Yu?et?al.，Bioorg.Med.Chem. Lett.(2001)11:2263-2267；和Kandimalla?et?al.，Bioorg.Med.Chem.(2001) 9:807-813)。另外，通過結構活性關系研究已經鑒定了多種合成基序和新的基 于DNA的結構，它們誘導的特異性免疫應答譜(profile)與非甲基化CpG二核 苷酸產生的截然不同[Kandimalla?ER，Bhagat?L，Li?Y，Yu?D，Wang?D，Cong?YP， Song?SS，Tang?JX，Sullivan?T,Agrawal?S.Proc?Natl?Acad?Sci?U?S?A. 2005；102:6925-30.Kandimalla?ER，Bhagat?L，Zhu?FG，Yu?D，Cong?YP，Wang?D， Tang?JX，Tang?JY，Knetter?CF，Lien?E，Agrawal?S.Proc?Natl?Acad?Sci?U?S?A. 2003；100:14303-8.Cong?YP，Song?SS，Bhagat?L，Pandey?RK，Yu?D，Kandimalla ER，Agrawal?S.Biochem?Biophys?Res?Commun.2003；310:1133-9.Kandimalla?ER， Bhagat?L，Cong?YP，Pandey?RK，Yu?D，Zhao?Q，Agrawal?S.Biochem?Biophys?Res Commun.2003；306:948-53.Kandimalla?ER，Bhagat?L，Wang?D，Yu?D，Zhu?FG， Tang?J，Wang?H，Huang?P，Zhang?R，Agrawal?S.Nucleic?Acids?Res. 2003；31:2393-400.Yu?D，Kandimalla?ER，Zhao?Q，Bhagat?L，Cong?Y，Agrawal?S. Bioorg?Med?Chem.2003；11:459-64.Bhagat?L，Zhu?FG，Yu?D，Tang?J，Wang?H， Kandimalla?ER，Zhang?R，Agrawal?S.Biochem?Biophys?Res?Commun. 2003；300:853-61.Yu?D，Kandimalla?ER，Bhagat?L，Tang?JY，Cong?Y，Tang?J， Agrawal?S.Nucleic?Acids?Res.2002；30:4460-9.Yu?D，Kandimalla?ER，Cong?Y， Tang?J，Tang?JY，Zhao?Q，Agrawal?S.J?Med?Chem.2002；45:4540-8.Yu?D，Zhu?FG， Bhagat?L，Wang?H，Kandimalla?ER，Zhang?R，Agrawal?S.Biochem?Biophys?Res Commun.2002；297:83-90.Kandimalla?ER，Bhagat?L，Yu?D，Cong?Y，Tang?J， Agrawal?S.Bioconjug?Chem.2002；13:966-74.Yu?D，Kandimalla?ER，Zhao?Q， Cong?Y，Agrawal?S.Nucleic?Acids?Res.2002；30:1613-9.Yu?D，Kandimalla?ER， Zhao?Q，Cong?Y，Agrawal?S.Bioorg?Med?Chem.2001；9:2803-8.Yu?D，Kandimalla ER，Zhao?Q，Cong?Y，Agrawal?S.Bioorg?Med?Chem?Lett.2001；11:2263-7. Kandimalla?ER，Yu?D，Zhao?Q，Agrawal?S.Bioorg?Med?Chem.2001；9:807-13.Yu D，Zhao?Q，Kandimalla?ER，Agrawal?S.Bioorg?Med?Chem?Lett.2000；10:2585-8， Putta?MR，Zhu?F，Li?Y，Bhagat?L，Cong?Y，Kandimalla?ER，Agrawal?S.Nucleic Acids?Res.2006，34:3231-8]。另外，對含有CpG的硫代磷酸酯寡核苷酸的其 它修飾也可影響它們作為免疫應答調節劑發揮作用的能力。參見，例如Zhao et?al.，Biochem.Pharmacol.(1996)51:173-182；Zhao?et?al.，Biochem?Pharmacol. (1996)52:1537-1544；Zhao?et?al.，Antisense?Nucleic?Acid?Drug?Dev.(1997) 7:495-502；Zhao?et?al.，Bioorg.Med.Chem.Lett.(1999)9:3453-3458；Zhao?et?al.， Bioorg.Med.Chem.Lett.(2000)10:1051-1054；Yu?et?al.，Bioorg.Med.Chem.Lett. (2000)10:2585-2588；Yu?et?al.，Bioorg.Med.Chem.Lett.(2001)11:2263-2267； 和Kandimalla?et?al.，Bioorg.Med.Chem.(2001)9:807-813。