[發(fā)明專利]用于檢測(cè)流感A型病毒的強(qiáng)毒株的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200680052391.5
• 申請(qǐng)日: 2006-12-26
• 公開（公告）號(hào): CN101336375A
• 公開（公告）日: 2008-12-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 難波靖治
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 株式會(huì)社比爾生命
• 主分類號(hào): G01N33/569
• 分類號(hào): G01N33/569;C12N15/09;C07K16/10;C12P21/08;G01N33/543;G01N33/577
• 代理公司: 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所
• 代理人: 羅菊華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及使用與除流感病毒A的強(qiáng)毒株外的所有流感病毒A亞 型反應(yīng)的抗體用于檢測(cè)流感病毒A的強(qiáng)毒株的方法，且更具體而言涉 及夾心免疫測(cè)定法，和特別地免疫層析測(cè)定法和免疫層析測(cè)定法裝置。 本發(fā)明涉及用于快速和簡(jiǎn)單的診斷流感病毒的強(qiáng)毒株，例如高致病性 禽流感病毒感染的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

高致病性禽流感是由對(duì)雞等顯示致命致病性的流感病毒引起的傳 染病。這種疾病也稱為雞瘟。在日本，這種疾病是根據(jù)家畜傳染病預(yù) 防法法律上指定的傳染病。同樣，高致病性禽流感由Office International?des?Epizooties(OIE)指定為L(zhǎng)ist?A疾病。

已引起此類高致病性禽流感的流感病毒歸入流感病毒A亞型僅H5 和H7。這些亞型不一定是強(qiáng)毒的。然而，當(dāng)家畜感染這些亞型時(shí)，無(wú) 論它們是強(qiáng)毒的還是減毒的，在日本所有動(dòng)物都必須被殺死。

就感染禽流感病毒的人類而言，禽流感病毒亞型H5、H7和H9感 染已得到報(bào)道。在這些中，H5N1亞型是已報(bào)道引起患者死亡的唯一 流感病毒。已報(bào)道流感病毒亞型H5N1感染引起嚴(yán)重的肺炎隨后為死 亡。

在1997年，由亞型H5N1引起的高致病性禽流感已在香港變得流 行。此外，在2003年后至今這已在幾個(gè)亞洲國(guó)家中變得如此流行，并 且甚至人類感染和死亡也已得到報(bào)道。

目前，亞型H5N1關(guān)于人類感染在全世界具有極大關(guān)注，并且被關(guān) 注在亞型H1N1和H3N2后在世界上引起新流感。

根據(jù)2005年11月17日的WHO報(bào)道，存在其中人類感染流感病毒 亞型H5N1得到證實(shí)的130個(gè)病例，并且在他們中，存在其中患者死亡 的67個(gè)病例。在2004年12月后，其中人類感染得到證實(shí)的病例數(shù)目 已快速增加，并且死亡人數(shù)也已增加。感染H5N1病毒后患者的死亡率 為51.3％(67/130)。

如由上文描述顯而易見的，人類感染亞型H5N1現(xiàn)在已變成現(xiàn)實(shí)。 為了預(yù)防流感的大規(guī)模感染，亞型H5N1感染的快速檢測(cè)是主要問題。 此外，快速診斷對(duì)于其治療也是重要的。

在當(dāng)前環(huán)境下，關(guān)于鳥類的高致病性禽流感的診斷通過(guò)下述方法 來(lái)進(jìn)行，所述方法包括收集來(lái)自懷疑病毒感染的患病鳥的氣管拭子或 泄殖腔拭子(泄殖腔的拭子)，將其接種在含胚雞蛋中用于培養(yǎng)，且 隨后分離病毒。然而，這種方法是不利的，因?yàn)樗枰獛滋煲垣@得結(jié) 果且因此結(jié)果無(wú)法快速獲得。使用最近開發(fā)的遺傳測(cè)試(PCR法、LAMP 法)，獲得結(jié)果所需的時(shí)間顯著減少。然而，因?yàn)檫@些遺傳測(cè)試需要 專用設(shè)備和技術(shù)，所以無(wú)法在家禽飼養(yǎng)所等進(jìn)行這些測(cè)試。

流感病毒通過(guò)人類上呼吸道、下呼吸道等進(jìn)行感染，并且在1-2 天的潛伏期后，病毒引起頭痛、腰痛、肌痛、全身不適、消化器官紊 亂等、以及發(fā)燒(38℃-39℃)。此類流感最成問題的并發(fā)癥包括在 老年人中的肺炎和在兒童中的腦炎/腦病。特別地，在兒童中的腦炎/ 腦病的特征在于它伴隨高燒、意識(shí)紊亂和驚厥。在兒童中的此類腦炎/ 腦病的預(yù)后極差，并且從最初癥狀到中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的表現(xiàn)或死亡 的時(shí)期極短。因此，快速診斷和治療是必要的。

先前，人僅基于前述臨床癥狀診斷為類似流感的疾病。然而，近 年來(lái)由于用于快速檢測(cè)流感病毒抗原的測(cè)試試劑盒的開發(fā)和廣泛傳 播，已可以在早期階段時(shí)診斷流感病毒傳染病。此類快速診斷試劑盒 包括利用酶聯(lián)免疫測(cè)定法(EIA)或免疫層析測(cè)定法作為原理的那些。 某些試劑盒僅檢測(cè)流感病毒A，和其他試劑盒共同檢測(cè)流感病毒A和B。 此外，某些其他試劑盒單獨(dú)檢測(cè)流感病毒A和B。

然而，目前的流感抗原測(cè)試使用所有A病毒共有的核蛋白反應(yīng)的 抗體。因此，無(wú)法進(jìn)行亞型H5與亞型H1N1或H3N2感染之間的鑒別診 斷，所有這些都是流感病毒A。

亞型H5N1感染引起嚴(yán)重的肺炎，并且死亡率極高。因此，在初次 診斷時(shí)進(jìn)行亞型H5感染的鑒別診斷是重要的，這還將用于確定關(guān)于患 者的治療策略。這還使得能夠采取措施例如在早期階段時(shí)患者的隔離 以防止進(jìn)一步的感染，這對(duì)于防止亞型H5N1感染的進(jìn)一步擴(kuò)大將是重 要的。

使用最近開發(fā)的遺傳測(cè)試(PCR法、LAMP法)，可以區(qū)別且檢測(cè) 亞型H5N1。然而，這些遺傳測(cè)試需要專用設(shè)備和技術(shù)，且因此不能說(shuō) 它們是簡(jiǎn)單的方法。

專利文件1：日本專利提前公開(Laid-open)(Kohyo)號(hào) 2004-509648