[發(fā)明專利]用于檢測流感A型病毒的強毒株的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200680052391.5
• 申請日: 2006-12-26
• 公開（公告）號: CN101336375A
• 公開（公告）日: 2008-12-31
• 發(fā)明（設計）人: 難波靖治
• 申請（專利權）人: 株式會社比爾生命
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;C12N15/09;C07K16/10;C12P21/08;G01N33/543;G01N33/577
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 羅菊華

1.用于檢測流感病毒A的強毒株的方法，其包括提供與所有流感 病毒A亞型反應的第一種抗體、和不與流感病毒A的強毒株反應但與除 所述強毒株外的所有流感病毒A亞型反應的第二種抗體，且進行免疫測 定法以檢測在與所述第一種抗體的反應中顯示陽性應答、和在與所述第 二種抗體的反應中顯示陰性應答的抗原。

2.根據(jù)權利要求1的檢測方法，其中所述免疫測定法包括使用所 述第一種抗體和與第三種抗體的夾心免疫測定法，所述第三種抗體與所 述第一種抗體與之反應的抗原反應，和/或使用所述第二種抗體和第四 種抗體的夾心免疫測定法，所述第四種抗體與所述第二種抗體與之反應 的抗原反應。

3.根據(jù)權利要求2的檢測方法，其中所述第一種抗體和所述第二 種或第四種抗體固定在載體中。

4.根據(jù)權利要求3的檢測方法，其中所述第三種抗體與所有流感 病毒A亞型反應，和所述第四種抗體不與流感病毒A的強毒株反應但與 除所述強毒株外的所有流感病毒A亞型反應。

5.根據(jù)權利要求3的檢測方法，其中可以彼此相同或不同的所述 第三種和第四種抗體與所有流感病毒A亞型反應。

6.根據(jù)權利要求1-5中任一項的檢測方法，其中所述第一種、第 二種、第三種和第四種抗體是針對流感病毒的核蛋白的單克隆抗體。

7.根據(jù)權利要求6的檢測方法，其中所述流感病毒A的強毒株是 選自亞型H5N1以及亞型H5N2和H7N1的強毒株中的至少一種。

8.根據(jù)權利要求7的檢測方法，其中所述流感病毒A的強毒株是 亞型H5N1。

9.一種免疫層析測定法，其包括：

提供具有第一個捕獲區(qū)帶和第二個捕獲區(qū)帶的膜載體，所述捕獲區(qū) 帶通過分別使第一種抗體和第二種抗體固定在其預定位置中形成，所述 第一種抗體與所有流感病毒A亞型反應，和所述第二種抗體不與流感病 毒A的強毒株反應但與除所述強毒株外的所有流感病毒A亞型反應；和

在所述膜載體中分別針對所述第一個捕獲區(qū)帶和所述第二個捕獲 區(qū)帶層析法地顯現(xiàn)第一種混合溶液和第二種混合溶液，所述第一種混合 溶液包含測試樣品和第三種抗體，所述第三種抗體與所述第一種抗體與 之反應的抗原反應，和所述第二種混合溶液包含所述測試樣品和第四種 抗體，所述第四種抗體與所述第二種抗體與之反應的抗原反應，或在所 述膜載體中針對2個所述捕獲區(qū)帶層析法地顯現(xiàn)所述第一種混合溶液，

由此流感病毒A的強毒株可以基于下述結果進行檢測：在與所述第 一種抗體的反應中的陽性應答顯示于所述第一個捕獲區(qū)帶中，同時在與 所述第二種抗體的反應中的陰性應答顯示于所述第二個捕獲區(qū)帶中。

10.根據(jù)權利要求9的測定法，其中所述第三種抗體與所有流感病 毒A亞型反應，和所述第四種抗體不與流感病毒A的強毒株反應但與除 所述強毒株外的所有流感病毒A亞型反應。

11.根據(jù)權利要求9的測定法，其中可以彼此相同或不同的所述第 三種和第四種抗體與所有流感病毒A亞型反應。

12.根據(jù)權利要求9-11中任一項的測定法，其中所述第一種、第 二種、第三種和第四種抗體是針對流感病毒的核蛋白的單克隆抗體。

13.根據(jù)權利要求12的測定法，其中所述流感病毒A的強毒株是 選自亞型H5N1以及亞型H5N2和H7N1的強毒株中的至少一種。

14.根據(jù)權利要求13的測定法，其中所述流感病毒A的強毒株是 亞型H5N1。

15.根據(jù)權利要求9的測定法，其中所述第三種和第四種抗體用金 屬膠體顆粒或乳膠顆粒進行標記。

16.根據(jù)權利要求15的測定法，其中所述膜載體是硝化纖維素。