[發明專利]用于生產L－谷氨酰胺的方法

有效

• 申請號: 200680052283.8
• 申請日: 2006-12-27
• 公開（公告）號: CN101336292A
• 公開（公告）日: 2008-12-31
• 發明（設計）人: 林干朗;前田匡毅;米谷良之
• 申請（專利權）人: 協和發酵工業株式會社
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/00;C12N15/09;C12P13/14
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 楊青;樊衛民

1.一種多肽，其氨基酸序列由源自屬于棒狀桿菌屬 (Corynebacterium)的微生物的谷氨酰胺合成酶2的氨基酸序列構成， 其中谷氨酰胺合成酶2的氨基酸序列是氨基酸序列SEQ?ID?NO：1的N 端第64位氨基酸位點的氨基酸，被除了谷氨酸以外的氨基酸取代，其 中當所述多肽在作為宿主細胞的野生型棒桿菌中表達時，L-谷氨酰胺的 產量比野生型棒桿菌更大，其中除了谷氨酸以外的氨基酸是賴氨酸。

2.一種DNA，其編碼權利要求1所述的多肽。

3.根據權利要求2中所述的DNA，其核苷酸序列由編碼源自屬于 棒狀桿菌屬(Corynebacterium)的微生物的谷氨酰胺合成酶2的DNA 核苷酸序列構成，其中谷氨酰胺合成酶2的DNA核苷酸序列是SEQ?ID? NO：2的5′端第190至192位核苷酸序列的區域是編碼除了谷氨酸以外 的氨基酸的密碼子的核苷酸序列，其中編碼除了谷氨酸以外的氨基酸 的密碼子是編碼賴氨酸的密碼子。

4.一種重組DNA，其包含權利要求2或3所述的DNA。

5.以權利要求4中所述的重組DNA轉化的微生物。

6.一種微生物，其在染色體DNA上包含權利要求2或3所述的 DNA。

7.根據權利要求5或6中所述的微生物，其具有生產多肽的能力 并具有溶菌酶敏感性，所述多肽的氨基酸序列由源自屬于棒狀桿菌屬 (Corynebacterium)的微生物的LtsA的氨基酸序列構成，其中所述多 肽的氨基酸序列是在氨基酸序列SEQ?ID?NO：10的N端第80位氨基酸 位點處的氨基酸是天冬氨酸的氨基酸序列。

8.根據權利要求6或7中所述的微生物，其中屬于棒狀桿菌屬的 微生物是谷氨酸棒桿菌(corynebacterium?glutamicum)。

9.用于生產L-谷氨酰胺的方法，其包括在培養基中培養根據權利 要求5至8中任意一項所述的微生物，以在培養物中形成和累積L-谷 氨酰胺，并從培養物回收L-谷氨酰胺。