[發明專利]結合層及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 200680047752.7
• 申請日: 2006-06-21
• 公開（公告）號: CN101341409A
• 公開（公告）日: 2009-01-07
• 發明（設計）人: 沙伊·尼邁里
• 申請（專利權）人: 生物輻射海法有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 北京天昊聯合知識產權代理有限公司
• 代理人: 丁業平;張天舒

1.一種結合層，其包含被至少一個羧酸基團或其衍生物取代的多 糖，其中所述羧酸基團或其衍生物的每一個β-原子都是氫原子或碳原 子，并且所述β-原子中的至少一個是碳原子，

并且其中多個所述羧酸基團或其衍生物中的至少一部分已經用N- 羥基琥珀酰亞胺或N-羥基硫代琥珀酰亞胺活化，從而形成具有反應活 性的酯，用于與配體分子結合。

2.根據權利要求1所述的結合層，其中所述多糖選自瓊脂糖、 海藻酸、支鏈淀粉、直鏈淀粉、鹿角菜膠、纖維素、甲殼素、殼聚糖、 葡聚糖、糖原、類肝素、肝素、透明質酸、果膠或它們的任意衍生物。

3.根據權利要求1所述的結合層，其中所述多糖為淀粉。

4.根據權利要求1所述的結合層，其中所述多糖選自海藻酸、 羧甲基葡聚糖、羧甲基纖維素、透明質酸、果膠或它們的任意衍生物。

5.根據權利要求1-4中任意一項所述的結合層，其中所述配體 分子選自核酸、肽、抗原、多克隆抗體、單克隆抗體、單鏈抗體、抗 體片段、聚糖、小的有機分子、細胞、病毒和細菌。

6.根據權利要求1所述的結合層，其中所述配體分子為生物樣 品。

7.根據權利要求1所述的結合層，其中所述配體分子為多肽。

8.根據權利要求1所述的結合層，其中所述配體分子為蛋白質。

9.根據權利要求1-4中任意一項所述的結合層，其中所述至少 一個羧酸基團與含有1至20個碳原子的連接分子鍵合。

10.根據權利要求9所述的結合層，其中所述連接分子含有2個 或3個碳原子。

11.根據權利要求1所述的結合層，其包含羧酸基團與酯的混合 物，所述的酯選自N-羥基琥珀酰亞胺酯和N-羥基硫代琥珀酰亞胺酯。

12.根據權利要求1-4中任意一項所述的結合層，其中所述多糖 被固定在具有表面的固體基底上。

13.根據權利要求12所述的結合層，其中所述基底為生物傳感 器的傳感元件。

14.根據權利要求13所述的結合層，其中所述傳感元件由選自 玻璃、塑料和具有自由電子的金屬中的材料構成。

15.根據權利要求14所述的結合層，其中所述具有自由電子的 金屬為金。

16.根據權利要求1所述的結合層，其中所述羧酸基團基本上被 全部活化。

17.根據權利要求1所述的結合層，其中至少50％的所述羧酸基 團被活化。

18.一種制備包含至少一個羧酸基團或其衍生物的結合層的方法， 其中所述至少一個羧酸基團或其衍生物中的每一個都具有碳原子或氫 原子作為β-原子，該方法包括下述步驟：

提供具有表面的基底；

將多糖固定在所述基底的表面上；

將所述多糖進行化學改性，從而形成從所述多糖中伸展出來的至少 一個羧酸基團或其衍生物，其中所述羧酸基團或其衍生物的每個β-原子 都是碳原子；以及

使用N-羥基琥珀酰亞胺或N-羥基硫代琥珀酰亞胺對所述羧酸基團 或其衍生物中的至少一部分進行活化，從而形成具有反應活性的酯，用 于與配體分子連接，

其中所述化學改性步驟和所述活化步驟彼此獨立，并可以在所述固 定步驟之前、所述固定步驟進行過程中或者在所述固定步驟之后發生。

19.根據權利要求18所述的方法，其中所述化學改性步驟包括使 至少一個具有β-氧原子的羧酸基團或其衍生物進行化學反應。

20.根據權利要求19所述的方法，其中所述化學反應是采用β-丙 氨酸或其任意的衍生物進行的酰胺化。

21.根據權利要求18-20中任意一項所述的方法，其中所述多糖 選自海藻酸、羧甲基葡聚糖、羧甲基纖維素、透明質酸、果膠或它們 的任意衍生物。