[發(fā)明專利]作為制造鹵化蔗糖的中間體的蔗糖－6－酯的酶促生產(chǎn)

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200680046221.6
• 申請日: 2006-11-28
• 公開（公告）號: CN101341165A
• 公開（公告）日: 2009-01-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 拉克什·拉南;巴楚·強德拉塞卡;彭巴巴斯·薩伯拉姆尼亞姆
• 申請（專利權(quán)）人: V.B.醫(yī)療保險私人有限公司
• 主分類號: C07H1/00
• 分類號: C07H1/00;C12N9/00;C07H13/02;C12P13/12
• 代理公司: 北京律誠同業(yè)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 徐金國

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及酶促生產(chǎn)蔗糖-6-酯，其是在制造包括1’-6’-二氯-1’-6’-二脫氧-β-呋喃果糖-4-氯-4-脫氧-吡喃半乳糖苷(TGS)以及其前體(TGS-6-酯)的鹵化(氯化)蔗糖時使用的中間體。

背景技術(shù)

現(xiàn)有技術(shù)方法生產(chǎn)4，1’，6’三氯半乳蔗糖(TGS)的策略主要包括通過使用Vilsmeier-Haack試劑來氯化蔗糖-6-酯以形成6-乙酰基-4，1’，6’-三氯半乳蔗糖，所述Vilsmeier-Haack試劑來源于諸如氯化氧磷、草酰氯、五氯化磷等的不同氯化試劑和諸如二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基乙酰胺的三級酰胺(tertiary?amide)。所述氯化反應(yīng)后，使用適宜的鈣、鈉等的堿性氫氧化物中和反應(yīng)物料至pH?7.0～7.5，然后優(yōu)選地進一步升高pH以使6-乙酰基-4，1’，6’-三氯半乳蔗糖去酯化(deesterify)/去乙酰化而形成4，1’，6’三氯半乳蔗糖(TGS)。

蔗糖-6-酯通常是利用酯化蔗糖而得到，是TGS的前體，TGS是用于食品和其它應(yīng)用中的零熱量強力甜味劑或味覺改進劑。然而，蔗糖的酯化必須單獨在6位進行，而這對于其制造是主要的挑戰(zhàn)，這是因為該酯化的目的位置的反應(yīng)性比其它更高反應(yīng)性的競爭位置(即，1’和6’位)更低。

為了實現(xiàn)區(qū)域選擇性的酯化，在制造蔗糖-6-酯的有機合成方式中已經(jīng)描述了各種方法，其包括但不限于酯化后由錫介導(dǎo)的加合物生成和蔗糖在嘧啶中的直接酯化。然而，通過有機合成的方法，即使是選擇性方法，也導(dǎo)致各種副產(chǎn)物的生成并且需要涉及分離步驟以在氯化前純化蔗糖-6-酯。在實現(xiàn)對位點特異酯化的更多控制上需要進一步的改進。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明公開了酶促酰化的方法，其中，當(dāng)蔗糖在新型脂酶或交聯(lián)脂酶存在下與適宜的酰基或芳基酯化劑(包括有機酸)反應(yīng)時，主要產(chǎn)物是6-酰基-蔗糖，該脂酶是在三級酰胺存在或不存在下或游離或固定化的形式，或是在任何其它適宜的溶劑(其中酶是穩(wěn)定的)中。根據(jù)酯化所用的反應(yīng)物，引入到蔗糖分子6位上的酯基可以是烷基、芳基、取代烷基或取代芳基。因此獲得的6-酰基-蔗糖可以用于制備鹵化蔗糖。

現(xiàn)有技術(shù)

Dordick等(1992)在美國專利no.5128248中公開了在4’-和6-位中的至少一個位置上對蔗糖或其衍生物進行酰化的方法，其中特別地，在存在微生物脂肪酶時，供體酰基酯與蔗糖或其衍生物在非羥基溶劑中反應(yīng)。所述供體酯是直鏈烷酸或苯甲酸的反應(yīng)性酯。

Bornemann等(1992)在美國專利no.5141860中公開了制備部分去酰化的蔗糖酰化產(chǎn)物的方法，該蔗糖酰化產(chǎn)物在每個環(huán)中具有至少在2-，3-和3′-位處的乙酰基以及至少一個游離羥基，其中蔗糖辛酰酯(sucroseoctaacylate)用酶或酶的組合處理，該酶或酶的組合能在緩沖至pH?5-7的水性介質(zhì)(包括水和高達(dá)50％的有機溶劑)中催化所述蔗糖辛酰酯的每個環(huán)上的至少一個酰基的水解，并分離生成的部分去酰化的蔗糖酰化產(chǎn)物，所述酶選自由胰脂酶、酵母酯酶、真菌、α-淀粉酶、枯草桿菌蛋白酶、蜂蜜曲霉蛋白酶和α-半乳糖苷酶組成的組中。

具體實施方式

酶促路線對其終產(chǎn)物顯著特異。它們也是非常底物特異性的。

本發(fā)明描述了利用酶生產(chǎn)蔗糖-6-酯的新型方法。其描述了對蔗糖高效且選擇性的酶促酯化。利用新型脂酶或交聯(lián)酯酶進行區(qū)域選擇性反應(yīng)，該酶是或者在三級酰胺存在或不存在時的游離或固定化形式或者在任何其它適宜的溶劑(其中酶是穩(wěn)定的)中。根據(jù)酯化所用的反應(yīng)物，引入到蔗糖分子6位上的酯基可以是烷基、芳基、取代烷基或取代芳基。因此獲得的6-酰基-蔗糖可以用于制備鹵化蔗糖，例如作為強力甜味劑的TGS。

所使用的酶可以是酯酶、脂酶等。這些酶可以固定在合成的聚合支撐物之中或之上，該聚合支撐物為例如但不限于聚丙烯酸，或聚苯乙烯或聚丙烯酰胺，基于尼龍的支撐物；或者像基于多糖的半合成的或天然的有機支撐物，該多糖為例如但不限于纖維素、淀粉、葡聚糖、瓊脂糖、幾丁糖、幾丁質(zhì)等；或者無機支撐物，例如基于碳、硅、氧化鋯、氧化鋁、磷酸鋯的那些，等等。