[發明專利]雙熒光報道基因構建物和測量翻譯再編碼的測定無效
| 申請號: | 200680040551.4 | 申請日: | 2006-08-30 |
| 公開(公告)號: | CN101384720A | 公開(公告)日: | 2009-03-11 |
| 發明(設計)人: | T·S·卡德諾;W·P·塔特 | 申請(專利權)人: | 奧塔哥創新有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/62 | 分類號: | C12N15/62;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 | 代理人: | 戈 泊 |
| 地址: | 新西蘭*** | 國省代碼: | 新西蘭;NZ |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 熒光 報道 基因 構建 測量 翻譯 編碼 測定 | ||
1.翻譯再編碼報告基因構建物,其包括:
a)第一熒光蛋白編碼序列;
b)編碼不同于第一熒光蛋白的熒光蛋白的第二熒光蛋白編碼序列; 和
c)介于第一熒光蛋白編碼序列和第二熒光蛋白編碼序列間的接頭 序列;和
d)介于第一熒光蛋白編碼序列和第二熒光蛋白編碼序列間的再編 碼信號序列,
其中第一熒光蛋白編碼序列和第二熒光蛋白編碼序列是相互在框 外的但在再編碼時共表達為單條融合多肽,并且其中接頭序列編碼能 物理隔離共表達的熒光蛋白的多肽,產生來源于每種蛋白的增加的熒 光輸出。
2.根據權利要求1的翻譯再編碼報告基因構建物,其中接頭編碼的多 肽降低了共表達的熒光蛋白間的熒光共振能量轉移(FRET)。
3.根據權利要求1或2的翻譯再編碼報告基因構建物,其中接頭編碼 包含基序A(EAAAK)nA的多肽,其中n是位于1和10間的整數。
4.根據權利要求3的翻譯再編碼報告基因構建物,其中n=2。
5.根據權利要求1的翻譯再編碼報告基因構建物,其中接頭編碼SEQ? ID?NO:1的序列。
6.根據權利要求1的翻譯再編碼報告基因構建物,其中接頭包括額外 的核苷酸來促進克隆。
7.根據權利要求1的翻譯再編碼報告基因構建物,其中接頭由SEQ?ID? NO:2的序列組成。
8.根據權利要求1的翻譯再編碼報告基因構建物,其中熒光蛋白是紅 色熒光蛋白和綠色熒光蛋白。
9.根據權利要求8的翻譯再編碼報告基因構建物,其中紅色熒光蛋白 編碼序列位于綠色熒光蛋白編碼序列的下游。
10.根據權利要求1的翻譯再編碼報告基因構建物,其中再編碼信號 序列介于第一熒光蛋白編碼序列和接頭序列間。
11.根據權利要求10的翻譯再編碼報告基因構建物,其中再編碼信號 序列是移碼信號序列。
12.根據權利要求11的翻譯再編碼報告基因構建物,其中移碼信號序 列是-1移碼信號序列。
13.根據權利要求12的翻譯再編碼報告基因構建物,其中-1移碼信號 序列是HIV-1gag/pol移碼信號序列。
14.根據權利要求11到13任一項的翻譯再編碼報告基因構建物,其 中移碼信號序列由SEQ?ID?NO:4的序列組成。
15.包含權利要求1到14任一項的翻譯再編碼報告基因構建物的載體。
16.包含權利要求1到14任一項的翻譯再編碼報告基因構建物的宿主 細胞。
17.包含權利要求15的載體的宿主細胞。
18.根據權利要求16的宿主細胞,其用所述構建物穩定轉化。
19.根據權利要求17的宿主細胞,其用所述載體穩定轉染。
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