[發(fā)明專利]用于制備L-甲硫氨酸的微生物和方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200680038488.0 | 申請日: | 2006-10-23 |
| 公開(公告)號: | CN101291590A | 公開(公告)日: | 2008-10-22 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | O·策爾德爾;A·赫羅爾德;C·克洛普羅格;H·施羅德;S·哈夫納;E·海因茨勒;C·維特曼;J·克勒默;J·G·佩羅;R·R·約卡姆;T·A·帕特森;M·威廉姆斯;T·赫爾曼 | 申請(專利權(quán))人: | 巴斯夫歐洲公司 |
| 主分類號: | A23K1/00 | 分類號: | A23K1/00;C12P13/12;C12N15/52 |
| 代理公司: | 北京市中咨律師事務(wù)所 | 代理人: | 黃革生;隗永良 |
| 地址: | 德國路*** | 國省代碼: | 德國;DE |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 用于 制備 甲硫氨酸 微生物 方法 | ||
1.過量產(chǎn)生L-甲硫氨酸的微生物,其中甲硫氨酸途徑中高羊毛氨酸的 形成和/或積累被減小和/或防止。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的微生物,其中與野生型微生物相比,轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋 白McbR的含量和/或生物活性降低。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的微生物,其中編碼McbR的基因被破壞和優(yōu) 選被消除。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的微生物,其中所述被破壞的mcbR基因防止功能 McbR蛋白質(zhì)的表達(dá)。
5.根據(jù)前面權(quán)利要求任一項的微生物,其中通過與野生型微生物相比 減小胱硫醚-γ-合酶(MetB)的含量和/或生物活性減小和/或防止甲硫氨酸途 徑中高羊毛氨酸的形成和/或積累。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的微生物,其中編碼MetB的基因被破壞和優(yōu)選被 消除。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的微生物,其中所述被破壞的metB基因防止功能 MetB蛋白質(zhì)的表達(dá)。
8.根據(jù)前面權(quán)利要求任一項的微生物,其中通過導(dǎo)入編碼胱硫醚-β- 裂合酶(MetC)突變體的異源基因減小和/或防止甲硫氨酸途徑中高羊毛氨 酸的形成和/或積累,所述突變體能夠?qū)⒏哐蛎彼嵊行мD(zhuǎn)化為高半胱氨 酸。
9.根據(jù)前面權(quán)利要求任一項的微生物,其中通過導(dǎo)入編碼胱硫醚-γ- 合酶(MetB)突變體的異源基因減小和/或防止甲硫氨酸途徑中高羊毛氨酸 的形成和/或積累,所述突變體能夠?qū)-乙酰基-高絲氨酸和半胱氨酸有效 轉(zhuǎn)化為胱硫醚(cystathione)并且不能將O-乙酰基-高絲氨酸和高半胱氨酸轉(zhuǎn) 化為高羊毛氨酸。
10.根據(jù)前面權(quán)利要求任一項的微生物,其中選自O(shè)-乙酰基高絲氨酸 硫化氫解酶(MetZ)、鈷(I)胺素依賴性甲硫氨酸合酶I(MetH)和鈷(I)胺素獨 立的甲硫氨酸合酶II(MetE)的蛋白質(zhì)的含量和/或生物活性與野生型微生 物相比增加。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的微生物,其中編碼選自具有O-乙酰基高絲氨 酸硫化氫解酶(MetZ)、鈷(I)胺素依賴性甲硫氨酸合酶I(MetH)和鈷(I)胺素 獨立的甲硫氨酸合酶II(MetE)活性的蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)的至少一種基因與野 生型微生物相比被增強和/或過表達(dá)。
12.根據(jù)前面權(quán)利要求任一項的微生物,其中所述微生物選自棒桿菌 細(xì)菌、分枝桿菌、鏈霉菌科、沙門氏菌屬、大腸桿菌、志賀氏菌屬、芽孢 桿菌屬、沙雷氏菌屬和假單胞菌屬。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的微生物,其中所述微生物是谷氨酸棒桿菌、大 腸桿菌或枯草芽孢桿菌。
14.制備L-甲硫氨酸的方法,其包括下面的步驟:
-培養(yǎng)和/或發(fā)酵微生物,其產(chǎn)生,優(yōu)選過量產(chǎn)生L-甲硫氨酸并且其中 甲硫氨酸途徑中高羊毛氨酸的形成和/或積累被減小和/或防止;和
-分離L-甲硫氨酸。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的方法,其中培養(yǎng)微生物,在所述微生物中胱硫 醚-γ-合酶(MetB)的含量和/或生物活性與野生型微生物相比減小。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的方法,其中培養(yǎng)微生物,在所述微生物中編碼 MetB的基因被破壞和優(yōu)選被消除。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的方法,其中所述被破壞的metB基因防止功能 MetB蛋白質(zhì)在所培養(yǎng)的微生物中的表達(dá)。
18.根據(jù)權(quán)利要求14到17之一的方法,其中培養(yǎng)微生物,在所述微 生物中轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白McbR的含量和/或生物活性與野生型微生物相比降 低。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的方法,其中培養(yǎng)微生物,在所述微生物中編碼 McbR的基因被破壞和優(yōu)選被消除。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法,其中所述被破壞的mcbR基因防止功能 McbR蛋白質(zhì)的表達(dá)。
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