[發(fā)明專利]突變體擴環(huán)酶及其在β－內(nèi)酰胺化合物生產(chǎn)中的用途

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200680025577.1
• 申請日: 2006-04-10
• 公開（公告）號: CN101300360A
• 公開（公告）日: 2008-11-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 迪克·希珀;理查德·克爾曼;羅拉納·麥德勒尼·拉姆斯多克;魯洛夫·阿利·蘭斯·伯韋比格
• 申請（專利權(quán)）人: 帝斯曼知識產(chǎn)權(quán)資產(chǎn)管理有限公司
• 主分類號: C12P37/00
• 分類號: C12P37/00;C12N9/02
• 代理公司: 北京東方億思知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 肖善強

1.一種突變體擴環(huán)酶，其為具有擴環(huán)酶活性的模型多肽的變體，其中 所述突變體擴環(huán)酶與具有擴環(huán)酶活性的模型多肽相比，對己二酰基-6-APA 的體外擴環(huán)酶活性至少提高2.5倍。

2.一種突變體擴環(huán)酶，其為具有擴環(huán)酶活性的模型多肽的變體，其中 所述突變體擴環(huán)酶在選自以下的氨基酸位置組的至少一個氨基酸位置上被 修飾：由位置2、59、73、89、90、99、101、105、113、155、170、 177、209、213、217、244、249、251、277、278、280、281、293、 300、306、307和311組成的組，其中使用Streptomyces?clavuligerus的 cefE基因編碼的擴環(huán)酶氨基酸序列(SEQ?ID?NO：1)的氨基酸位置編號。

3.根據(jù)權(quán)利要求2的突變體擴環(huán)酶，其中所述突變體擴環(huán)酶在選自以 下的氨基酸位置組的至少一個氨基酸位置上被修飾：由位置2、59、89、 90、99、105、113、170、177、209、213、217、249、251、278、280和 293組成的組，更優(yōu)選地選自由位置2、89、90、99、105、177、251、 278、280和293組成的組。

4.根據(jù)權(quán)利要求1的突變體擴環(huán)酶，其至少在選自權(quán)利要求2所述組 中的至少一個氨基酸位置上被修飾，或在選自權(quán)利要求3所述任一組中的 至少一個氨基酸位置上被修飾。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項的突變體擴環(huán)酶，其包含至少2個或更 多個選自以下的氨基酸位置：由位置2、89、277、281和300組成的組， 優(yōu)選地在位置2+281或89+281或277+300上。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的突變體擴環(huán)酶，其包含至少3個或更 多選自以下的氨基酸位置：由位置2、89、281、293和311組成的組，優(yōu) 選在位置2+89+281或89+281+311或89+281+293上。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項的突變體擴環(huán)酶，其包含至少4個或更 多選自以下的氨基酸位置：由位置2、73、89、90、217、244、277、 281、306、307和311組成的組，更優(yōu)選地在位置2+277+280+281或 2+281+306+311或73+89+281+311或89+217+281+311或89+244+281+311 或89+281+307+311或277+281+306+31189+281+306+31190+281 +306+311上。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項的突變體擴環(huán)酶，其包含至少5個或更 多個選自以下的氨基酸位置：由位置2、73、89、155、213、249、281、 293、300、306和311組成的組，更優(yōu)選地在位置2+89+281+306+311或 2+155+281+306+311或73+89+213+281+311或89+281+293+300+311或 89+249+281+306+311上。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項的突變體擴環(huán)酶，其包含至少6個選自 由位置90+105+113+281+306+311組成的組的氨基酸位置。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項的突變體擴環(huán)酶，其包含至少7個或更 多個選自以下的氨基酸位置：由位置73、89、105、113、155、177、 277、280、281、293、300、306、307和311組成的組，更優(yōu)選地為 73+89+281+293+300+307+311或105+113+155+177+281+306+311或 155+177+277+280+281+306+311。

11.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項的突變體擴環(huán)酶，其包含至少8個或 更多選自以下的氨基酸位置：由位置2、90、99、105、113、155、177、 277、281、306和311組成的組，更優(yōu)選地在 2+90+99+105+113+281+306+311或2+90+105+113+155+177+277+281上。