[發(fā)明專利]合成的基因調(diào)控區(qū)無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200680021029.1 | 申請日: | 2006-06-09 |
| 公開(公告)號: | CN101198617A | 公開(公告)日: | 2008-06-11 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | M·庫爾茨;J·布賴恩;M·K·布朗洛;L·舒爾茨;M·C·洛薩達(dá);K·揚(yáng)森 | 申請(專利權(quán))人: | 默克公司 |
| 主分類號: | C07H21/04 | 分類號: | C07H21/04;C12N1/19 |
| 代理公司: | 中國專利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 程淼;黃可峻 |
| 地址: | 美國新*** | 國省代碼: | 美國;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 合成 基因 調(diào)控 | ||
1.一種合成的基因調(diào)控區(qū),所述合成的基因調(diào)控區(qū)包括:包含酵母菌株的基因調(diào)控蛋白的結(jié)合位點的合成的基因調(diào)控序列,和位于所述合成的基因調(diào)控序列下游的來自絲狀真菌菌株的啟動子;其中,所述啟動子能夠被該酵母菌株的通用轉(zhuǎn)錄因子和RNA聚合酶識別;其中,所述合成的基因調(diào)控序列能夠調(diào)節(jié)由所述酵母菌株中的絲狀真菌啟動子引發(fā)的轉(zhuǎn)錄。
2.權(quán)利要求1的調(diào)控區(qū),其中,所述結(jié)合位點是合成的結(jié)合位點。
3.權(quán)利要求1的調(diào)控區(qū),其中,所述酵母菌株是釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)。
4.權(quán)利要求1的調(diào)控區(qū),其中,所述酵母菌株是巴斯德畢赤氏酵母(Pichiapastoris)。
5.權(quán)利要求1的調(diào)控區(qū),其中,所述酵母菌株是多形漢遜酵母(Hansenulapolymorpha)。
6.權(quán)利要求1的調(diào)控區(qū),其中,所述酵母菌株是Yarrowia?lipolytica。
7.權(quán)利要求1的調(diào)控區(qū),其中,所述絲狀真菌菌株選自由玉米黑粉菌(Ustilago?maydis)、構(gòu)巢曲霉(Aspergillus?nidulans)和Penicillium?purpurogenum組成的組。
8.權(quán)利要求7的調(diào)控區(qū),其中,所述啟動子選自由Penicillium?purpurogenum的XynA基因的啟動子、玉米黑粉菌(Ustilago?maydis)的DPM1基因的啟動子和構(gòu)巢曲霉(Aspergillus?nidulans)的ArgB基因的啟動子組成的組。
9.權(quán)利要求1的調(diào)控區(qū),其中,所述基因調(diào)控蛋白的結(jié)合位點是該酵母菌株的基因激活子的結(jié)合位點。
10.權(quán)利要求9的調(diào)控區(qū),其中,所述結(jié)合位點是釀酒酵母的GAL4蛋白的結(jié)合位點。
11.權(quán)利要求10的調(diào)控區(qū),其中,所述結(jié)合位點包含選自由SEQ?ID?NO:10、11、12和15組成的組的DNA序列。
12.權(quán)利要求1的調(diào)控區(qū),其中,所述基因調(diào)控蛋白的結(jié)合位點是所述酵母菌株基因阻遏物的結(jié)合位點。
13.權(quán)利要求9的調(diào)控區(qū),其中所述基因調(diào)控序列還包含基因阻遏物的結(jié)合位點。
14.權(quán)利要求10的調(diào)控區(qū),其中,所述基因調(diào)控序列還包含釀酒酵母的MIG1蛋白的結(jié)合位點。
15.權(quán)利要求14的調(diào)控區(qū),其中,所述MIG1蛋白的結(jié)合位點包含選自由SEQ?ID?NO:18、19和20組成的組的序列。
16.權(quán)利要求1的調(diào)控區(qū),其中,所述合成的基因調(diào)控區(qū)包含選自由SEQ?IDNO:21、22、23、24、25和26組成的組的序列。
17.一種DNA表達(dá)載體,所述載體包含:合成的基因調(diào)控區(qū),所述合成的基因調(diào)控區(qū)包括:包含酵母菌株的基因調(diào)控蛋白的結(jié)合位點的合成的基因調(diào)控序列,和位于所述合成的基因調(diào)控序列下游的來自絲狀真菌菌株的啟動子;其中,所述啟動子能夠被該酵母菌株的通用轉(zhuǎn)錄因子和RNA聚合酶識別;其中,所述合成的基因調(diào)控序列能夠調(diào)節(jié)由所述酵母菌株中的絲狀真菌啟動子引發(fā)的轉(zhuǎn)錄;編碼序列,所述編碼序列在所述調(diào)控區(qū)的控制下編碼蛋白質(zhì)、多肽或肽,以及酵母選擇標(biāo)記物。
18.權(quán)利要求17的DNA表達(dá)載體,所述載體還包含位于所述編碼序列下游的聚腺苷酸化信號序列。
19.權(quán)利要求17的DNA表達(dá)載體,所述載體還包含位于所述編碼序列下游的轉(zhuǎn)錄終止子。
20.權(quán)利要求17的DNA表達(dá)載體,其中,所述酵母選擇標(biāo)記物是釀酒酵母選擇標(biāo)記物。
21.權(quán)利要求20的DNA表達(dá)載體,其中,所述釀酒酵母選擇標(biāo)記物選自由LEU2、TRP1、URA3和HIS3組成的組。
22.權(quán)利要求20的DNA表達(dá)載體,所述載體還包含釀酒酵母的復(fù)制起點。
23.權(quán)利要求22的DNA表達(dá)載體,其中,所述釀酒酵母的復(fù)制起點基于釀酒酵母2μm?DNA序列。
24.權(quán)利要求17的DNA表達(dá)載體,所述載體還包含細(xì)菌復(fù)制起點。
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