[發明專利]多肽

無效

• 申請號: 200680009568.3
• 申請日: 2006-03-08
• 公開（公告）號: CN101184502A
• 公開（公告）日: 2008-05-21
• 發明（設計）人: S·J·福斯特;J·加西亞－拉臘
• 申請（專利權）人: 阿布辛西生物有限公司
• 主分類號: A61K39/07
• 分類號: A61K39/07;A61K39/085;A61K39/395;C07K7/06;C07K14/31
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司
• 代理人: 郭廣迅;曹津燕

本發明涉及通過病原微生物表達的抗原性多肽、包括所述抗原性多肽的疫苗和針對所述抗原性多肽的治療性抗體。

背景

目前醫藥開發面對的一個問題是許多重要病原微生物的抗生素抗性菌株的進化。產生抗生素抗藥性的病原生物的一個例子是金黃色葡萄球菌。金黃色葡萄球菌(S.aureus)是一種細菌，其正常生長環境是約20-40％的正常健康人的鼻粘膜上皮，也常在人的皮膚上發現，通常并不導致損害。然而，在某些情況下，特別是當皮膚破損時，該微生物可以導致感染。在醫院里，病人可能做了外科手術和/或是服用了免疫抑制藥物，這是醫院中的一種特殊問題。由于病人們已經接受的治療，他們對于金黃色葡萄球菌的感染更加容易受到傷害。近年來出現了金黃色葡萄球菌的抗性菌株。二甲氧基苯青霉素的抗性菌株開始流行起來，并且這些抗性菌株中的許多是也對若干其它抗生素具有抗性。目前尚無針對金黃色葡萄球菌的有效的免疫程序。

本發明涉及有效的疫苗成分和治療劑，其針對避免或降低直接抗性的病原菌株的問題。

在土壤革蘭氏陽性細菌枯草芽胞桿菌(Bacillus?subtilis)的染色體的大約4100個基因中，271個基因對于其生長是必要的(“必需的”)，并且其中23個在所述生物的生理學中的作用不明確(gcp，obg，ppaC-yybQ-，trmU，yacA，yacM，ydiB，ydiC，yjbN，ykqC，ylaN，yloQ，ylqF，ymdA，yneS，yphC，yqeH，yqeI，yqjK，yrvO，ysxC，ytaG，ywlC)(Kunst等人，1997)。迄今為止，由這些基因編碼的同源蛋白被發現于另一種革蘭氏陽性細菌，即人病原體金黃色葡萄球菌的各種菌株中。其中，Gcp和YneS的直向同源物被預測為膜蛋白(參見附錄I)，而其余的則被預測為細胞質蛋白(數據未予顯示)。不過，Obg已經顯示出在枯草芽胞桿菌中是部分地與膜結合的(Kobayashi等人，2001)。

本發明人已經分離得到了一些多肽，所述多肽為該病原體枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌生長的必需成分，并且已經得到了抗這些多肽的抗血清。本發明人發現抗所述枯草芽孢桿菌多肽而產生的的抗血清會導致所述金黃色葡萄球菌被極其有效地殺滅。該作用是不能預測到的。

這些發現促進了疫苗和抗體治療劑的開發，所述疫苗和抗體治療劑能夠減輕當前治療劑中的一些問題，例如抗生素的抗性問題。

本發明公開內容的簡短說明

本發明提供抗原性多肽，所述多肽對革蘭氏陽性細菌枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的生長是必需的，并且被用于治療或預防微生物的感染。

根據本發明的第一方面，本發明提供一種用作藥物的抗原性多肽，或該多肽的部分，其通過分離的核酸序列編碼，該分離的核酸序列選自：

i)如圖1到6所示的核酸序列；

ii)(i)中的核酸序列，其編碼通過病原生物表達的多肽；

iii)雜交到上述(i)或(ii)中定義的序列上的核酸序列；和

iv)由于在(i)、(ii)或(iii)中定義的核酸序列的遺傳密碼而簡并的核酸序列。

在本發明的一個優選的方面，所述藥物是疫苗。

編碼本發明第一方面的抗原性多肽的核酸可以在嚴謹雜交條件下退火為圖1至6中所示的核酸序列或退火為其互補鏈。

嚴謹雜交/洗滌的條件是所屬技術領域中眾所周知的。例如，在0.1×SSC，0.1％SDS中于60℃下洗滌后，核酸的雜交物是穩定的。本領域中眾所周知的是，如果核酸序列是已知的，則其最佳的雜交條件是可以計算的。例如，雜交條件可通過要進行雜交的核酸的GC含量來確定。請參見Sambrook等人(1989)，Molecular?Cloning；A?Laboratory?Approach。用于計算實現在規定同源性的核酸分子之間雜交所要求的嚴謹條件的常用公式的為：

T_m＝81.5℃+16.6Log[Na⁺]+0.41[％G+C]-0.63(％甲酰胺)。

編碼本發明第一方面的抗原性多肽的核酸可以包括圖1至6列出的序列，或者與圖1至6的序列在核酸殘基水平上至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％，例如98％或99％同源的序列。