[發明專利]VEGF拮抗劑制劑

有效

• 申請號: 200680008569.6
• 申請日: 2006-03-22
• 公開（公告）號: CN101141975A
• 公開（公告）日: 2008-03-12
• 發明（設計）人: D·迪克斯;K·弗萊;S·考特茲
• 申請（專利權）人: 瑞澤恩制藥公司
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;A61K47/00
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 李瑛

發明領域

本發明涉及含有能夠抑制血管內皮生長因子(VEGF)的物質的藥物制劑，并涉及制備和使用該制劑的方法。本發明包括具有提高了的穩定性的藥物制劑。

相關技術綜述

血管內皮生長因子(VEGF)表達在人癌癥中幾乎普遍存在，與其作為腫瘤新血管生成的關鍵介體的作用相一致。VEGF功能通過與分子或其VEGFR-2受體結合的阻斷抑制了多個不同異種移植物模型中植入的腫瘤細胞的生長(參見，例如，Gerber等人(2000)Cancer?Res.60：6253-6258)。已經描述了可溶性VEGF特異性融合蛋白拮抗劑，被稱為“VEGF捕集物(trap)”(Kim等人(2002)Proc.Natl.Acad.Sci.USA?99：11399-404；Holash等人(2002)Proc.Natl.Acad.Sci.USA?99：11393-8)。

凍干(在受控條件下冷凍干燥)通常用于蛋白質的長期貯藏。凍干的蛋白質在凍干狀態下基本上能抵抗降解、聚集、氧化和其他退化過程(參見，例如，U.S.6,436,897)。

發明簡述

在此提供了VEGF特異性融合蛋白拮抗劑的穩定制劑。本發明的藥物學上可接受制劑包括VEGF“捕集物”拮抗劑和藥物學上可接受的載體。具體實施方案中，提供了液體和冷凍干燥或凍干制劑。

第一個方面中，本發明的特征在于VEGF特異性融合蛋白拮抗劑的穩定液體制劑，包括含有基本上由第一個VEGF受體的免疫球蛋白樣(Ig)結構域2和第二個VEGF受體的Ig結構域3構成的受體成分和多聚化成分的融合蛋白、一種或多種緩沖劑和一種或多種熱穩定劑。VEGF特異性融合蛋白拮抗劑的具體實施方案中，第一個VEGF受體是Flt1而第二個VEGF受體是Flk1或Flt4。更具體的實施方案中，融合蛋白具有SEQ?ID?NO：2或SEQ?ID?NO：4的氨基酸序列。一個實施方案中，緩沖劑是磷酸鹽緩沖劑和/或檸檬酸鹽。更優選，緩沖劑是磷酸鹽和檸檬酸鹽。一個實施方案中，熱穩定劑是NaCl和/或蔗糖。更優選，熱穩定劑是NaCl和蔗糖兩者。

具體實施方案中，VEGF特異性融合蛋白拮抗劑的穩定液體制劑包括1-10mM磷酸鹽緩沖劑、1-10mM檸檬酸鹽、25-150mM?NaCl、5-30％蔗糖、10-50mg/ml融合蛋白，約6-6.5的pH。更具體的實施方案中，穩定的液體制劑包括5mM磷酸鹽緩沖劑、5mM檸檬酸鹽緩沖劑、100mMNaCl、20％蔗糖、25mg/ml融合蛋白，約6.0的pH。此外，可以存在聚山梨酸酯，例如0.05-0.15％聚山梨酸酯20。本發明的VEGF特異性融合蛋白拮抗劑的穩定液體制劑以25mg/ml的VEGF制劑在-80℃貯藏約6個月后幾乎沒有呈現出沉淀并且在5℃貯藏6個月后幾乎沒有沉淀。

第二個方面中，本發明的特征在于VEGF拮抗劑的高濃度穩定液體制劑，該制劑包括1-50mM組氨酸、25-150mM?NaCl、5-30％蔗糖、50-100mg/ml融合蛋白，約6-6.5的pH，和0.1-0.5％聚山梨酸酯或1-5％PEG。更具體的實施方案中，高濃度穩定液體制劑包括10mM組氨酸、50mM?NaCl、5-20％蔗糖、50-100mg/ml融合蛋白，約6.0-6.5的pH，和0.1％聚山梨酸酯(例如，聚山梨酸酯20)或3％PEG(例如，PEG?3350)。本發明的VEGF特異性融合蛋白拮抗劑的高濃度穩定液體制劑在5℃貯藏15個月后(70或100mg/ml?VEGF捕集蛋白)呈現出少于約3％降解或在24個月后(50mg/ml)少于約1.5％降解。

第三個方面中，本發明的特征在于血管內皮生長因子(VEGF)特異性融合蛋白拮抗劑凍干前制劑，包括(i)含有基本上由第一個VEGF受體的免疫球蛋白樣(Ig)結構域2和第二個VEGF受體的Ig結構域3構成的受體成分和多聚化成分的融合蛋白，(ii)緩沖劑，(iii)有機助溶劑或增量劑，和(iv)一種或多種凍干保護劑(lyoprotectant)。各種不同的實施方案中，緩沖劑是組氨酸，有機助溶劑或增量劑是PEG，且凍干保護劑是甘氨酸和蔗糖中的至少一種。一個實施方案中，本發明的凍干前制劑不含有防腐劑。