[發明專利]豬繁殖與呼吸綜合征－安卡拉牛痘病毒基因工程疫苗有效
| 申請號： | 200610166610.4 | 申請日： | 2006-12-31 |
| 公開（公告）號： | CN101209351A | 公開（公告）日： | 2008-07-02 |
| 發明（設計）人： | 王忠德;封江南;孫永林;胡勤勤;吳娟;王遷遷;魏佳;李超;嚴俊 | 申請（專利權）人： | 國營武昌造船廠 |
| 主分類號： | A61K48/00 | 分類號： | A61K48/00;A61K39/285;A61P31/20 |
| 代理公司： | 武漢開元專利代理有限責任公司 | 代理人： | 夏惠忠;樊戎 |
| 地址： | 430060*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 繁殖 呼吸 綜合征 安卡拉 牛痘 病毒 基因工程 疫苗 | ||
1.豬繁殖與呼吸綜合征-安卡拉牛痘病毒基因工程疫苗，其特征在于，它是含有用豬偏愛密碼子替換了原有天然密碼子的豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5基因的安卡拉牛痘病毒。
2.根據權利要求1所述的豬繁殖與呼吸綜合征-安卡拉牛痘病毒基因工程疫苗，其特征在于所述的用豬偏愛密碼子替換了原有天然密碼子的豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5基因具有序列表中序列1所述的核苷酸序列。
3.豬繁殖與呼吸綜合征-安卡拉牛痘病毒基因工程疫苗，其特征在于，它是含有序列表中序列2所述的核苷酸序列的安卡拉牛痘病毒。
4.一種豬繁殖與呼吸綜合征-安卡拉牛痘病毒基因工程疫苗的制備方法，包括以下步驟：
(1)從天然豬繁殖與呼吸綜合征病毒中PCR擴增GP5基因；
(2)用豬的偏愛密碼子替代天然GP5基因中的密碼子，使天然豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5基因核苷酸序列得到優化，優化的GP5基因序列稱為GP5A，合成該優化的序列GP5A；
(3)將優化的GP5基因克隆到真核表達載體JN-2中；
(4)將構建的JN-2-GP5質粒與安卡拉牛痘病毒重組；
(5)篩選得到豬繁殖與呼吸綜合征GP5基因安卡拉牛痘重組病毒。
5.一種豬繁殖與呼吸綜合征-安卡拉牛痘病毒基因工程疫苗的制備方法，包括以下步驟：
(1)從天然豬繁殖與呼吸綜合征病毒中PCR擴增GP5基因；
(2)用豬的偏愛密碼子替代天然GP5基因中的密碼子，使天然豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5基因核苷酸序列得到優化，優化的GP5基因序列稱為GP5A；合成該優化的序列GP5A；
(3)利用PCR將優化的GP5A基因中的表位A替換為豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5基因的表位B，新合成的基因稱為GP5-DB基因；
(4)將GP5-DB基因克隆到真核表達載體JN-2中；
(5)將構建的JN-2-GP5-DB質粒與安卡拉牛痘病毒重組；
(6)篩選得到豬繁殖與呼吸綜合征GP5-DB基因安卡拉牛痘重組病毒。
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