[發明專利]一種用HPLC法分析西多福韋原料及其制劑的方法

無效

• 申請號: 200610165389.0
• 申請日: 2006-12-19
• 公開（公告）號: CN101206209A
• 公開（公告）日: 2008-06-25
• 發明（設計）人: 胡楊
• 申請（專利權）人: 北京德眾萬全藥物技術開發有限公司
• 主分類號: G01N30/96
• 分類號: G01N30/96
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種高效液相分析方法，尤其是一種用HPLC法分析分離西多福韋原料及其制劑的方法。

背景技術

西多福韋是開環核苷酸類似物，能抑制病毒DNA聚合酶，對巨細胞病毒有強的抑制作用，對單純皰疹病毒、帶狀皰疹病毒、人類乳頭瘤病毒等也有很強的抑制作用。被廣泛的用于免疫功能低下患者巨細胞病毒感染的預防和治療。其結構式為

其在合成的過程當中有幾步中間體(有關物質)需要嚴格控制，其結構式分別為

中間體1中間體2

中間體3

對于合成西多福韋中引入的有關物質，不論是在原料藥還是制劑中都是需要進行質量控制的。因此，實現西多福韋及其有關物質的分離在西多福韋的合成和制劑過程的質量控制方面具有現實意義。

經反復試驗發現，用以季銨鹽為鍵合相的強陰離子交換柱(SAX(250mm×4.6mm))，采用甲醇-(0.01mol/L磷酸二氫鈉，磷酸調pH4.0)＝40∶60為流動相，可以將西多福韋及其有關物質進行有效分離，從而可以準確控制西多福韋原料藥及制劑的質量。本發明的方法能簡便、快速、準確地分析西多福韋的純度和含量并能有效的控制其有關物質。

發明內容

本發明的目的在于提供一種分析分離西多福韋及其有關物質的高效液相色譜方法，從而保證西多福韋的純度，實現其原料及制劑的質量控制。

本發明所述的用高效液相色譜法分析西多福韋的純度以及分離其有關物質的方法，是采用以季銨鹽為鍵合相的強陰離子交換柱(SAX(250mm×4.6mm))，采用甲醇-(0.01mol/L磷酸二氫鈉，磷酸調pH4.0)＝40∶60為流動相。

上述所說的離子交換色譜柱選自以季銨鹽為鍵合相的強陰離子交換柱(SAX(250mm×4.6mm))。

本發明的流動相中有機相選自下列化合物：甲醇、乙醇、乙腈。

本發明的方法，有機相-緩沖液的體積比為50∶50～20∶80。

上述所說的流動相中緩沖液的pH＝3～4.5。

本發明所述的分析分離方法，可按照以下方法實現：

(1)取各中間體與西多福韋的混合樣品適量，用緩沖液溶解樣品，配制成每1mL含混合樣0.5mg的樣品溶液。

(2)設置流動相流速為1.0mL/min，檢測波長為237nm，柱溫為室溫。

(3)取(1)的樣品溶液20μL注入液相色譜儀，完成西多福韋及其有關物質的分離與分析。

其中：

高效液相色譜儀：島津：LC-10ATvp，SPD-M10Avp

色譜柱：SAX(250mm×4.6mm)

流動相：甲醇-(0.01mol/L磷酸二氫鈉，磷酸調pH4.0)＝40∶60

流速：1.0mL/min

檢測波長：260nm

柱溫：室溫

進樣體積：20μL

本發明采用強陰離子交換色譜柱SAX(250mm×4.6mm)，能夠有效的分離西多福韋及其有關物質，準確測定西多福韋的純度；本發明解決了西多福韋及其有關物質的分離問題，從而確保了西多福韋原料藥及其制劑的質量可控。(結果見附圖1)

附圖說明

圖1最優選條件的PHLC圖，圖1中1號峰為中間體3，2號峰為中間體2，3號峰為西多福韋，4號峰為中間體1，可以看出在該條件下西多福韋主峰可以和三個中間體完全分離開來，且西多福韋主峰在11min左右。

圖2有機相為乙腈的HPLC圖，圖2中1號峰為中間體3和中間體2，2號峰為西多福韋，3號峰為中間體1。可以看出，西多福韋與中間體2，中間體3分離良好，且剛好可以和中間體1達到基線分離。

圖3甲醇與緩沖液比例為20∶80時的HPLC圖，圖3中1號峰為中間體3，2號峰為中間體2，3號峰為西多福韋，4號峰為中間體1，可以看出在該條件下西多福韋主峰可以和三個中間體完全分離開來，且西多福韋主峰在6min左右。

圖4緩沖液濃度為0.02mol/L時的HPLC圖，圖4中1號峰為中間體3，2號峰為中間體2，3號峰為西多福韋，4號峰為中間體1，可以看出在該條件下西多福韋主峰可以和三個中間體完全分離開來，且西多福韋主峰在6min左右。

圖5pH為3時的HPLC圖，圖5中1號峰為中間體3，2號峰為中間體2，3號峰為西多福韋，4號峰為中間體1，可以看出在該條件下西多福韋主峰可以和三個中間體完全分離開來，且西多福韋主峰在6min左右。