[發(fā)明專利]一種分離純化嗜鐵鉤端螺旋菌的方法無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 200610136739.0 | 申請(qǐng)日: | 2006-11-24 |
| 公開(公告)號(hào): | CN101191121A | 公開(公告)日: | 2008-06-04 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 柳建設(shè);謝學(xué)輝;王秀美;肖升木;田卓力 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 中南大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C12N1/20 | 分類號(hào): | C12N1/20 |
| 代理公司: | 中南大學(xué)專利中心 | 代理人: | 胡燕瑜 |
| 地址: | 410083*** | 國(guó)省代碼: | 湖南;43 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 分離 純化 鐵鉤 螺旋菌 方法 | ||
1.一種分離純化嗜鐵鉤端螺旋菌的方法,其特征在于包含以下步驟:
(1)將采集的酸性礦坑水樣品用無(wú)機(jī)鹽液培養(yǎng)基富集培養(yǎng)一代,然后將其傳代用一種新的選擇性液體培養(yǎng)基A-M培養(yǎng),選擇性液體培養(yǎng)基A-M成分為:(NH4)2SO4?3g/L,KCl?0.1g/L,K2HPO4?0.5g/L,MgSO4·7H2O?0.5g/L,Ca(NO3)0.01g/L,MnSO4?1.0g/L,Al2(SO4)3·18H2O?2.1g/L,F(xiàn)eSO4·7H2O?44.5-60.0g/L,培養(yǎng)基pH值為1.5-1.7,培養(yǎng)溫度為38-42℃;
(2)制作單層固體培養(yǎng)基平板??其配方由A,B和C三部分組成:A成分同于上述選擇性液體培養(yǎng)基A-M成分:(NH4)2SO4?3g/L,KCl?0.1g/L,K2HPO40.5g/L,MgSO4·7H2O?0.5g/L,Ca(NO3)0.01g/L,MnSO4?1.0g/L,Al2(SO4)3·18H2O?2.1g/L,溶于400mL蒸餾水;B:普通瓊脂10-15g溶于300mL蒸餾水;C:FeSO4·7H2O?44.5-60.0g/L,KSCN?15.5-25.0g/L溶于300mL蒸餾水;將A和B部分別在115-121℃蒸汽滅菌,時(shí)間20-30mins,最后將A,B和C三部分混合,調(diào)pH值至2.0-3.5,倒于平板上;
(3)將步驟(1)所得培養(yǎng)物傳代培養(yǎng)3~4次且每次稀釋后傳代,最后將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)物取適量稀釋20-100倍;取菌液均勻涂布在單層固體培養(yǎng)基上,涂有菌液的固體培養(yǎng)基平板先正置5~10分鐘,待菌液吸收后倒置于36-45℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng),得到菌落。
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