[發明專利]甾體化合物分析方法

有效

• 申請號: 200610129589.0
• 申請日: 2006-11-24
• 公開（公告）號: CN101191788A
• 公開（公告）日: 2008-06-04
• 發明（設計）人: 朱潤芝;李媛;李靜
• 申請（專利權）人: 天津藥業研究院有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種新的甾體化合物分析方法，尤其是涉及[17α，16α-d]噁唑啉甾體化合物以及其合成涉及的一些中間體的分析方法。

背景技術

[17α，16α-d]噁唑啉甾體化合物是非常有用的一類甾體活性化合物，代表藥物有地夫可特。地夫可特是第三代糖皮質激素甾體抗炎藥，是潑尼松龍的噁唑啉衍生物，主要用于類風濕性關節炎，腎病綜合癥、系統性紅斑狼瘡、眼色素層炎、結節病的治療及器官移植。文獻Drugs?Res.30(II)，Nr，9(1980)提到地夫可特抗炎活性明顯強于潑尼松龍，文獻Drugs50(2)：317-313，1995提到，在風濕性關節炎治療中地夫可特與氫化潑尼松或六甲強龍一樣有效，在兒童的慢性關節炎治療中此藥與潑尼松相當。

[17α，16α-d]噁唑啉甾體化合物最早在20世紀60年代由意大利Gruppo?Lepetit公司開發得到。其分析方法的相關報道，主要有地夫可特的分析方法。簡單介紹如下：

文獻Sci.Pharm.，64(2)，225-244(German)1996.里提到：使用反相高效液相色譜來分析地夫可特，使用Hypersil色譜柱。流動相：水∶甲醇＝(60～0)∶(40～100)(體積比)。此方法可以用來分析39種甾體化合物。

文獻J.Chromatogr.Sci.，35(9)，439-445(English)1997里提到：使用反相高效液相色譜來分析地夫可特，使用Hypersil色譜柱。流動相：磷酸(PH＝3)∶乙腈＝60∶40(體積比)。

文獻J.Chromatogr.，B：Biomed.Sci.Appl.，724(1)，53-63(English)1999里提到：使用高效液相色譜來分析地夫可特，使用Hypersil??(250mm×3.2mm?I.D.)C18色譜柱，流速0.5ml/min。流動相：十二烷基磺酸鈉加有機溶劑，有機溶劑可選自四氫呋喃，丙醇和丁醇。

文獻Journal?of?Liquid?Chromatography&Related?Technologies，26(13)，2141-2156(English)2003里提到：使用反相高效液相色譜，流動相為：乙腈∶甲醇∶0.067KH?₂PO₄＝27∶20∶53(體積比)，加上紫外光譜分析，可以用來分析原材料，藥品以及人體血漿中的地夫可特。

文獻Journal?of?Liquid?Chromatography&Related?Technologies，27(12)，1915-1924(English)2004里提到：使用高效液相色譜來分析地夫可特中的雜質方法，其流動相為：0.025M磷酸鈉緩沖液加入乙腈/水中(PH＝6.9)，使用液相色譜微預柱(Hypersil?ODS)。

傳統文獻上的方法雖然可以用來分析地夫可特，但是適用性范圍比較窄，有的甚至僅限于分析地夫可特，而不能分析其中間體，造成對反應過程中的變化無法進行有效監督。在實際的合成工作中，我們通過研究，對地夫可特的合成工藝進行了研究，研制出一條新的工藝路線。為了了解這條工藝路線中的各個中間體的含量和變化過程，監控反應過程，需要一種適用性很廣泛的分析方法，比如在ZL200610129276.5提到的合成[17α，16α-d]噁唑啉甾體化合物以及其合成涉及的一些中間體，需要做系統分析比較，即合成路線上涉及到的中間體以及成品，盡量能夠使用同一個液相分析方法處理，這樣便于科研試驗分析比較，加快科研進度。而目前的方法尚無法解決該問題。

發明內容

針對[17α，16α-d]噁唑啉甾體化合物以及合成涉及的一些中間體系統分析方法問題，本發明提供了一個全新的地夫可特液相分析方法，該方法能夠系統分析[17α，16α-d]噁唑啉甾體化合物以及其合成涉及的一些中間體的高效液相方法。方法如下：

照高效液相色譜法(中國藥典2005年版二部附錄V?D)測定。

色譜條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈和醋酸銨溶液為流動相。

測定過程：取測試樣品適量，精密稱定，加乙腈溶解并用乙腈稀釋制成一定濃度Ca的溶液，搖勻，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取測試樣品的對照品適量，精密稱定，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得到該樣品的液相含量C％。

C％＝Aa/As×Cs/Ca×100％

Aa為測試樣品液相主峰面積；As為測試樣品的對照品液相主峰面積；