[發(fā)明專(zhuān)利]人乳頭瘤病毒16型外殼蛋白病毒樣顆粒及其制備方法和用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200610127387.2
• 申請(qǐng)日: 2006-09-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101148661A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許雪梅;許于飛;張洪濤;宋國(guó)興;司靜懿;劉世德
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/09
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/09;C12N15/866;C12N15/12;C07K19/00;C12N1/21;C12N5/10;C12N7/01;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 程偉

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是采用基因分子生物學(xué)技術(shù)及基因工程蛋白技術(shù)，獲得一種修飾后的，具有高度組裝成病毒樣顆粒(VLPs)能力的，病毒衣殼蛋白基因；及其表達(dá)出來(lái)的重組蛋白，即病毒樣顆粒。本發(fā)明還涉及該病毒樣顆粒的疫苗及其用途。

發(fā)明背景

人乳頭瘤病毒是一類(lèi)無(wú)胞膜的小DNA病毒，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)100多型，主要感染人的粘膜上皮，引起上皮組織的良惡性增生。研究發(fā)現(xiàn)有十五種HPV亞型的感染可引起宮頸癌前病變及宮頸癌，這些亞型被定義為高危型如HPV16，18，31，33，45，等。大量的研究結(jié)果表明慢性持續(xù)性高危型人乳頭瘤病毒感染是婦女宮頸癌的明確誘因，其中由HPV16感染誘發(fā)的宮頸癌占宮頸癌發(fā)病總數(shù)的50％以上。研究發(fā)現(xiàn)我國(guó)宮頸癌患者HPV16的陽(yáng)性率高達(dá)79.6％(Wu?Y，et.al.Association?ofhigh-risk?HPV?types?and?viral?load?with?cervical?cancer?in?China.J?Clin.Virol.2006；35(3)：264-269)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，利用基因工程重組技術(shù)表達(dá)的病毒外殼蛋白L1或L1及L2，體外可自組裝成空的病毒顆粒(Virus-likeparticles，VLPs)，VLPs除了不含病毒核酸，不具致病性之外，但可經(jīng)病毒的感染相關(guān)受體高效率的進(jìn)入宿主細(xì)胞，包括抗原遞呈細(xì)胞，其它特性如外形、空間構(gòu)象以及免疫原性幾乎與天然病毒顆粒完全一樣，VLPs免疫后可誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生高滴度的中和抗體，保護(hù)機(jī)體免受同一型別病毒的攻擊或自然感染。目前國(guó)際上VLPs疫苗的表達(dá)體系主要有兩種：桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)體系及啤酒酵母表達(dá)體系，兩種表達(dá)體系生產(chǎn)的VLPs均在歐美等地區(qū)進(jìn)行了臨床試驗(yàn)，結(jié)果表明VLPs疫苗安全性好，在性活躍期及性活躍期前婦女接種HPV16及HPV18VLPs疫苗三次后，通過(guò)迄今5-6年隨訪觀察發(fā)現(xiàn)，接種疫苗可以明確高效的預(yù)防宮頸HPV感染、宮頸管內(nèi)上皮不典型增生及早期宮頸癌的發(fā)病率。現(xiàn)有技術(shù)中，人們研制的利用酵母表達(dá)體系獲得的HPV16、HPV18、HPV6、HPV11L1VLPs宮頸癌預(yù)防疫苗“Gardasil”已經(jīng)上市。還有人利用桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)體系獲得的HPV16L1VLPs、HPV18L1VLPs疫苗也在世界許多國(guó)家及地區(qū)進(jìn)行臨床試驗(yàn)，結(jié)果表明疫苗接種3次后對(duì)宮頸HPV16、18病毒感染、宮頸癌前病變及宮頸癌的預(yù)防保護(hù)效果在5年期以上(Harper?DM，et.al.Efficacy?of?a?bivalent?L1?virus-likeparticle?vaccine?in?prevention?of?infection?with?human?papillomavirus?types?16?and?18in?young?women：a?randomised?controlled?trial.Lancet.2004；364：1757-1765；Harper?DMet.al.Sustained?efficacy?up?to?4.5?years?of?a?bivalent?L1?virus-like?particle?vaccineagainst?human?papillomavirus?16?and?18：follow-up?from?a?randomised?control?trial.Thelancet.2006；Internet：1-9.)。因此病毒樣顆粒疫苗市場(chǎng)開(kāi)發(fā)前景廣闊。特別是廣大的貧困落后地區(qū)是宮頸癌的高發(fā)區(qū)，急需研發(fā)具有使用價(jià)值的VLPs疫苗，降低疫苗的成本，提高人群的免疫保護(hù)效率。