[發(fā)明專利]生產(chǎn)植酸酶的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200610103778.0
• 申請日: 2006-08-01
• 公開（公告）號: CN101117628A
• 公開（公告）日: 2008-02-06
• 發(fā)明（設計）人: 佟建明;王志紅;薩仁娜;張琪;董曉芳;吳瑩瑩
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所;山西三盟實業(yè)發(fā)展有限公司
• 主分類號: C12N9/16
• 分類號: C12N9/16;C12N1/14;C12R1/66
• 代理公司: 北京瑞成興業(yè)知識產(chǎn)權(quán)代理事務所
• 代理人: 李慧

技術領域

本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)植酸酶的方法。?

背景技術

磷是動物機體必須的礦物元素，為了滿足飼料業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)的需求，消耗了大量昂貴的磷礦資源。只有很小部分磷沉積到體內(nèi)和畜產(chǎn)品中，因而對環(huán)境，特別是集約化飼養(yǎng)時，對地下水和土壤的污染十分嚴重。?

隨著生物技術的發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)植酸酶成為解決飼料用磷問題最有吸引力的途徑。單胃動物飼料中通過添加植酸酶，可以提高飼料中植酸磷(或磷酸鹽)的利用率，減少畜禽排泄物中磷的排出對環(huán)境和水的污染。隨著生物技術特別是采用DNA重組技術后，使植酸酶在生產(chǎn)中的大量應用成為可能。作為動物飼料添加劑的微生物植酸酶已大量地商品化生產(chǎn)。?

在天然作物中，如玉米胚芽、大豆等中也含有植酸酶，但是其含量低，而且作物的生長周期長。以此提取植酸酶，成本太高、周期長，不適合于產(chǎn)業(yè)化。?

現(xiàn)有的植酸酶的生產(chǎn)是通過具有產(chǎn)植酸酶特性的菌種發(fā)酵得到，一般有兩種發(fā)酵方法：固體發(fā)酵培養(yǎng)和液體發(fā)酵培養(yǎng)。現(xiàn)有的液體發(fā)酵培養(yǎng)，例如：培養(yǎng)基采用葡萄糖：30.0g；可溶性淀粉：30.0g；MgSO₄·7H₂O：0.5g；KCl：0.5g；Fe₂SO₄：0.03g；MnSO₄：0.03g；麥麩：5.0g；NH₄NO₃：5.0g；CaCO₃：5.0g混合后，用pH5.5的醋酸—醋酸鈉緩沖液配制而成。液體培養(yǎng)基中接入黑曲霉—903，29℃發(fā)酵培養(yǎng)4d。現(xiàn)有的固體發(fā)酵培養(yǎng)的方法：可采用加水量為35％的麩皮作為培養(yǎng)基，接入黑曲霉AN00101，37℃，培養(yǎng)114h。無論是固體培養(yǎng)基還是液體培養(yǎng)基其成本均很高，因此一種成本低的用于制備植酸酶的方法成為本領域技術人員的目標。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的所要解決的技術問題是，提供一種新的植酸酶的生產(chǎn)方法，其能夠克服現(xiàn)有生產(chǎn)方法中的缺陷，采用一種成本低的固體成分作?為培養(yǎng)基進行發(fā)酵培養(yǎng)的方法。?

本發(fā)明的上述目的通過以下技術方案實現(xiàn)：一種生產(chǎn)植酸酶的方法，其特征在于：其是利用醋糟作為固體培養(yǎng)基，接種能夠生產(chǎn)植酸酶的微生物菌種，進行發(fā)酵，從而得到植酸酶；其中所接種的微生物菌種優(yōu)選：無花果曲霉(Aspergillus?ficuum)。?

本發(fā)明所述的生產(chǎn)植酸酶的方法，其生產(chǎn)工藝過程為：?

(1)將醋糟培養(yǎng)基裝入容器，調(diào)整培養(yǎng)基的含水量；(2)進行滅菌；(3)在無菌條件下進行接種微生物菌種；(4)發(fā)酵。?

本發(fā)明所述的生產(chǎn)植酸酶的方法，其接種量為：每15克的醋糟中接種無花果曲霉1×10⁶～5×10⁶個菌。?

其最佳接種量為：每15克的醋糟中接種無花果曲霉2×10⁶～4×10⁶個菌。?

本發(fā)明所述的生產(chǎn)植酸酶的方法，其培養(yǎng)基醋糟的含水量按重量計為50％～75％。?

培養(yǎng)基醋糟的含水量按重量計最佳范圍為55％～65％。?

本發(fā)明所述的生產(chǎn)植酸酶的方法，發(fā)酵的時間為2～6天。?

最佳發(fā)酵的時間為2～4天。?

本發(fā)明所述的生產(chǎn)植酸酶的方法，其特征在于：所述滅菌的條件為：121℃、0.1MPa，時間為20分鐘；所述發(fā)酵溫度為27℃。?

利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)植酸酶是該酶生產(chǎn)的唯一途徑，本發(fā)明人在經(jīng)過對醋糟的研究，發(fā)現(xiàn)醋糟中大約含有7％～15％的粗灰分、2％～9％粗脂肪、9％～15％的粗蛋白、27％～36％的粗纖維，0.20％～0.40％的鈣、0.03％～0.08％的磷等營養(yǎng)成分，這些營養(yǎng)成分可以被二次發(fā)酵再利用。?

在二次發(fā)酵利用的研究過程中，意外地發(fā)現(xiàn)可以采用醋糟作為培養(yǎng)基生產(chǎn)植酸酶，其科技含量較高，而且具有原創(chuàng)性。而且與現(xiàn)有的植酸酶的生產(chǎn)方法相比，其培養(yǎng)基的成本大幅度地降低，本發(fā)明的培養(yǎng)基是采用生產(chǎn)醋的廢棄物——醋糟，變廢為寶，使醋糟得到了合理再利用。?

具體實施方式

本發(fā)明下面結(jié)合具體實施例詳細描述本發(fā)明的內(nèi)容，以便更好地了解本發(fā)明。?