[發明專利]無機磷診斷/測定試劑盒及無機磷濃度的測定方法

無效

• 申請號: 200610097314.3
• 申請日: 2006-10-30
• 公開（公告）號: CN101173937A
• 公開（公告）日: 2008-05-07
• 發明（設計）人: 王爾中
• 申請（專利權）人: 蘇州艾杰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/84
• 分類號: G01N33/84;G01N21/78;G01N21/25;C12Q1/32;C12Q1/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種酶循環擴增法、酶比色法及酶聯法技術的無機磷濃度測定方法，其方法原理如下：

無機磷+谷氨酰胺+腺苷二磷酸?谷氨酰胺合成酶

????????????????????氨離子+谷氨酸+腺苷三磷酸

腺苷三磷酸+丙酮酸+二氧化碳?丙酮酸羧化酶

????????????????????無機磷+腺苷二磷酸+草酰乙酸

氨離子+2-酮戊二酸酯+還原型輔酶?谷氨酸脫氫酶

?????????????????????L-谷氨酸+水+輔酶

將最終反應物置于紫外/可見光分析儀或半、全自動生化分析儀下，檢測主波長340nm吸光度下降的大小速度，測算出無機磷濃度大小測定結果。

2.一種無機磷診斷/測定試劑盒，主要成分包括：

緩沖液??????????20-500mmol/L

穩定劑??????????1-50mmol/L

還原型輔酶??????0.1-0.35mmol/L

丙酮酸羧化酶????1000-500000U/L

谷氨酰胺合成酶??1000-500000U/L

谷氨酸脫氫酶????1000-500000U/L

腺苷二磷酸??????1-12mmol/L

谷氨酰胺????????4-20mmol/L

2-酮戊二酸酯????4-20mmol/L

丙酮酸??????5-20mmol/L

二氧化碳????5-20mmol/L

其特征在于：試劑盒可以是干粉狀態，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液體試劑，直接使用。

3.根據權利要求2所述無機磷診斷/測定試劑盒，其特征在于：由緩沖液、穩定劑、腺苷二磷酸、谷氨酰胺、丙酮酸、二氧化碳、2-酮戊二酸酯、丙酮酸羧化酶(EC?6.4.1.1)、谷氨酰胺合成酶(EC6.3.1.2)、谷氨酸脫氫酶(EC?1.4.1.2；EC?1.4.1.3、EC?1.4.1.4)、還原型輔酶組成單劑試劑。

4.根據權利要求2所述無機磷診斷/測定試劑盒，其特征在于：由緩沖液、穩定劑、腺苷二磷酸、谷氨酰胺、丙酮酸、二氧化碳、2-酮戊二酸酯、丙酮酸羧化酶(EC?6.4.1.1)、谷氨酰胺合成酶(EC6.3.1.2)、谷氨酸脫氫酶(EC?1.4.1.2；EC?1.4.1.3、EC?1.4.1.4)、還原型輔酶組成雙劑試劑；試劑1，由緩沖液、穩定劑、腺苷二磷酸、谷氨酰胺、丙酮酸、二氧化碳、2-酮戊二酸酯、還原型輔酶組成；試劑2，由緩沖液、穩定劑、丙酮酸羧化酶、谷氨酰胺合成酶、谷氨酸脫氫酶組成。腺苷二磷酸、谷氨酰胺、丙酮酸、二氧化碳、2-酮戊二酸酯、丙酮酸羧化酶、谷氨酰胺合成酶、谷氨酸脫氫酶、還原型輔酶在試劑1或試劑2中的位置可以不限。

5.根據權利要求2所述無機磷診斷/測定試劑盒，其特征在于：由緩沖液、穩定劑、腺苷二磷酸、谷氨酰胺、丙酮酸、二氧化碳、2-酮戊二酸酯、丙酮酸羧化酶(EC?6.4.1.1)、谷氨酰胺合成酶(EC6.3.1.2)、谷氨酸脫氫酶(EC?1.4.1.2；EC?1.4.1.3、EC?1.4.1.4)、還原型輔酶組成多劑試劑；試劑1，由緩沖液、穩定劑、腺苷二磷酸、谷氨酰胺、丙酮酸、二氧化碳、2-酮戊二酸酯、還原型輔酶組成；試劑2，由緩沖液、穩定劑、丙酮酸羧化酶、谷氨酰胺合成酶組成；試劑3，由緩沖液、穩定劑、谷氨酸脫氫酶組成。腺苷二磷酸、谷氨酰胺、丙酮酸、二氧化碳、2-酮戊二酸酯、丙酮酸羧化酶、谷氨酰胺合成酶、谷氨酸脫氫酶、還原型輔酶在試劑1、試劑2或試劑3中的位置可以不限。

6.根據權利要求2所述無機磷診斷/測定試劑盒，其特征在于：還包括穩定劑1-4000mmol/L或0.1％-100％體積比。所述穩定劑為：硫酸銨(Ammonia?Sulfate)、甘油(Glycerol)、丙二醇(PropyleneGlycol)、乙二醇(Ethylene?glycol)及防腐劑中的至少一種。