[發(fā)明專(zhuān)利]同型半胱氨酸診斷試劑盒及同型半胱氨酸濃度測(cè)定方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200610085366.9
• 申請(qǐng)日: 2006-06-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101089595A
• 公開(kāi)（公告）日: 2007-12-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王爾中
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 蘇州艾杰生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N21/31
• 分類(lèi)號(hào): G01N21/31;G01N21/78;G01N33/50;G01N33/52;G01N33/68;C12Q1/00
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• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種同型半胱氨酸濃度測(cè)定方法，其方法原理如下：

同型半胱氨酸+腺苷基蛋氨酸??同型半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶腺苷基同型半胱氨酸+蛋氨酸

腺苷基同型半胱氨酸+氧+水??氨基酸氧化酶??腺苷基硫代丁酮酸+氨+過(guò)氧化氫

蛋氨酸+氧+水?氨基酸氧化酶??含氧酸+氨+過(guò)氧化氫

2氨離子+2α-酮戊二酸酯+2還原型輔酶??谷氨酸脫氫酶2谷氨酸+2水+2輔酶

腺苷基硫代丁酮酸(S-adenosyl-γ-thio-ketobutyrate)含氧酸(oxo-acid)

將最終反應(yīng)物輔酶置于紫外/可見(jiàn)光分析儀或半、全自動(dòng)生化分析儀下，檢測(cè)主波長(zhǎng)340nm吸光度下降的大小程度，測(cè)算出同型半胱氨酸濃度大小測(cè)定結(jié)果。

本發(fā)明測(cè)定同型半胱氨酸濃度的方法，其還原型輔酶可以是NADPH、NADH或thio-NADH中的一種。

2.一種同型半胱氨酸診斷試劑盒，主要成分包括：

緩沖液????????????????????20-500mmol/L

穩(wěn)定劑????????????????????1-50mmol/L

同型半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶????200-500000U/L

氨基酸氧化酶??????????????200-500000U/L

丙氨酸脫氫酶??????????????200-500000U/L

S-腺苷基蛋氨酸????????0.1-20mmol/L

丙酮酸????????????????0.1-20mmol/L

還原型輔酶????????????0.15-0.35mmol/L

其特征在于：試劑盒可以是干粉狀態(tài)，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液體試劑，直接使用。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述同型半胱氨酸診斷試劑盒，其特征在于：由緩沖液、穩(wěn)定劑、S-腺苷基蛋氨酸(S-adenosyl-L-methionine)、同型半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶(homocysteine?S-methyltransferase?EC2.1.1.10)、氨基酸氧化酶(Amino?Acid?Oxidase?EC?1.4.3.2、EC1.4.3.3)、丙氨酸脫氫酶(EC?1.4.1.1)、丙酮酸、還原型輔酶組成單劑試劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述同型半胱氨酸診斷試劑盒，其特征在于：由緩沖液、穩(wěn)定劑、S-腺苷基蛋氨酸(S-adenosyl-L-methionine)、同型半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶(homocysteine?S-methyltransferase?EC2.1.1.10)、氨基酸氧化酶(Amino?Acid?Oxidase?EC?1.4.3.2、EC1.4.3.3)、丙氨酸脫氫酶(EC?1.4.1.1)、丙酮酸、還原型輔酶組成雙劑試劑；試劑1，由緩沖液、穩(wěn)定劑、氨基酸氧化酶、丙氨酸脫氫酶、丙酮酸、還原型輔酶組成；試劑2，由緩沖液、穩(wěn)定劑、同型半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶、S-腺苷基蛋氨酸組成。S-腺苷基蛋氨酸、同型半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶、氨基酸氧化酶、丙氨酸脫氫酶、丙酮酸、還原型輔酶在試劑1或試劑2中的位置可以不限。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述同型半胱氨酸診斷試劑盒，其特征在于：由緩沖液、穩(wěn)定劑、S-腺苷基蛋氨酸(S-adenosyl-L-methionine)、同型半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶(homocysteine?S-methyltransferase?EC2.1.1.10)、氨基酸氧化酶(Amino?Acid?Oxidase?EC?1.4.3.2、EC1.4.3.3)、丙氨酸脫氫酶(EC?1.4.1.1)、丙酮酸、還原型輔酶組成多劑試劑；試劑1，由緩沖液、穩(wěn)定劑、丙酮酸、還原型輔酶組成；試劑2，由緩沖液、穩(wěn)定劑、丙氨酸脫氫酶、氨基酸氧化酶組成；試劑3，由緩沖液、穩(wěn)定劑、同型半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶、S-腺苷基蛋氨酸組成。S-腺苷基蛋氨酸、同型半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶、氨基酸氧化酶及丙氨酸脫氫酶、丙酮酸、還原型輔酶在試劑1、試劑2或試劑3中的位置可以不限。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述同型半胱氨酸診斷試劑盒，其特征在于：還包括穩(wěn)定劑1-4000mmol/L或0.1％-100％體積比。所述穩(wěn)定劑為：硫酸銨(Ammonia?Sulfate)、甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene?Glycol)、乙二醇(Ethylene?glycol)及防腐劑中的至少一種。