[發明專利]層疊雜交熒光放大磁分離檢測DNA的方法

無效

• 申請號: 200610035695.2
• 申請日: 2006-05-31
• 公開（公告）號: CN101082583A
• 公開（公告）日: 2007-12-05
• 發明（設計）人: 聶立波;賀全國;陳洪;何農躍
• 申請（專利權）人: 中山耐樂生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;C12Q1/68
• 代理公司: 中山市科創專利代理有限公司
• 代理人: 尹文濤

1.一種層疊雜交熒光放大磁分離檢測DNA的方法，其特征在于包括下列步驟：

(A)、在SiO₂納米顆粒上同時標記a，b兩種序列不同的DNA，其中序列a的量遠大于序列b的量；

(B)、在磁性納米顆粒表面標記e序列的DNA；

(C)、第一次三明治雜交：靶DNA的一端與SiO₂納米顆粒上b序列的DNA雜交，靶DNA的另一端與磁性納米顆粒上e序列的DNA雜交；

(D)、另一種SiO₂納米顆粒上同時標記c，d兩種序列不同的DNA，其中序列c的量遠大于序列d的量；

(E)、另一種SiO₂納米顆粒上c序列的DNA與熒光DNA雜交；

(F)、第二次三明治雜交：第一次三明治雜交后的SiO₂納米顆粒上a序列的DNA與連接DNA的一端雜交，連接DNA的另一端與熒光雜交后的納米顆粒上d序列的DNA雜交；

(G)、第二次三明治雜交后產物經磁分離清洗后，去除多余的熒光分子和非特異性吸附；再將第二次三明治雜交后產物DNA變性，解鏈后的熒光DNA即可進行熒光檢測。