[發明專利]嗜中性顆粒蛋白NGP的表達和純化有效
| 申請號： | 200610027829.6 | 申請日： | 2006-06-20 |
| 公開（公告）號： | CN101092616A | 公開（公告）日： | 2007-12-26 |
| 發明（設計）人： | 孫兵;謝德鄂;劉智多;李振虎;鐘超 | 申請（專利權）人： | 中國科學院上海生命科學研究院 |
| 主分類號： | C12N15/09 | 分類號： | C12N15/09;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/62;C07K19/00;C07K14/435;C12N1/21;C12N15/65;A61K38/17 |
| 代理公司： | 上海專利商標事務所有限公司 | 代理人： | 徐迅 |
| 地址： | 20003*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 中性 顆粒 蛋白 ngp 表達 純化 | ||
1.一種制備嗜中性顆粒蛋白NGP的方法，包括以下步驟：
(a)PCR擴增獲得嗜中性顆粒蛋白NGP的編碼序列；
(b)將(a)所述的嗜中性顆粒蛋白NGP的編碼序列插入表達載體的多克隆位點中，獲得插入了嗜中性顆粒蛋白NGP編碼序列的表達載體；
(c)使(b)獲得的插入了嗜中性顆粒蛋白NGP編碼序列的表達載體轉入宿主細胞，獲得轉化的宿主細胞；
(d)培養轉化的宿主細胞，從而表達出嗜中性顆粒蛋白NGP；
(e)分離獲得嗜中性顆粒蛋白NGP。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，通過PCR擴增嗜中性顆粒蛋白NGP的基因，并且，在PCR擴增時，采用LA-Taq?DNA聚合酶作為DNA聚合酶。
3.一種NGP-GST融合蛋白，其特征在于，所述的融合蛋白具有SEQID?NO：2所示的氨基酸序列。
4.一種分離的多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸編碼權利要求3所述的融合蛋白。
5.一種基因工程表達載體，其特征在于，所述的表達載體含有嗜中性顆粒蛋白的編碼序列，或含有權利要求4所述的多核苷酸。
6.一種遺傳工程化的宿主細胞，其特征在于，所述的宿主細胞中含有權利要求5所述的表達載體。
7.如權利要求6所述的宿主細胞，其特征在于，所述的宿主細胞是大腸桿菌Escherichia?coli?BL21/pGEX-4t-1-NGP，其在中國典型培養物保藏中心的保藏號為CCTCC?M?206020。
8.嗜中性顆粒蛋白NGP的用途，其特征在于，用于作為鑒定Th2細胞的分子標記；或用于制備調節Th2細胞生長和分化的制劑；或用于篩選調節Th2細胞生長和分化的制劑。
9.嗜中性顆粒蛋白NGP的用途，其特征在于，用于制備抑制脾細胞增殖的組合物。
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