[發明專利]從連翹提取物中純化連翹酯苷A的方法

有效

• 申請號: 200610027024.1
• 申請日: 2006-05-29
• 公開（公告）號: CN101081855A
• 公開（公告）日: 2007-12-05
• 發明（設計）人: 玄振玉;王勇;黃孝春;于莉;林君
• 申請（專利權）人: 上海玉森新藥開發有限公司
• 主分類號: C07H15/18
• 分類號: C07H15/18;C07H1/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種中藥連翹提取物的純化方法，屬于醫藥技術領域。

背景技術：

連翹(Fructus?Forsythiae)為木犀科連翹屬植物。在我國傳統古方中，常用連翹的果實入藥，與其它清熱解毒類藥物共同使用，起到清熱解毒、散結消腫的作用，為2000年版《中國藥典》收載的常用中藥。國內外學者對連翹化學成分及藥理研究較多，已經認識到連翹的抗菌抗病毒活性非常顯著。其主要的抗菌抗病毒活性成分是連翹酯苷，而連翹酯苷中幾乎全部是連翹酯苷A在起作用，它對金黃色葡萄球菌等十一種致病菌均有極強的抑制作用，還具有很強的抗真菌、抗病毒的作用。以前是以連翹苷作為考察連翹提取工藝的指標，近年來隨著連翹的有效成分研究深入發現連翹苷無抗菌活性。從而已逐漸將連翹酯苷A作為連翹藥材質量評價的標準，在中成藥中用作控制產品質量的指標。連翹酯苷A的結構式如下：

文獻中也記載了一些連翹酯苷A的制備方法。如采用聚酰胺加壓柱色譜法進行初步分離，再用葡聚糖凝膠柱純化，用甲醇及水系統洗脫，或者用水、不同濃度的甲醇、乙醇溶液為溶劑，進行超聲提取等方法。但是文獻中反復提到了一個問題就是連翹的抗菌活性成分極不穩定，其中的連翹酯苷A為咖啡酸的衍生物，分子結構中具有酯鍵和糖苷鍵，在酸、堿和高溫條件下容易分解，而分解后產生的咖啡酸、D-葡萄糖、L-鼠李糖和一次級苷的抗菌活性大大減弱。由于以前未能注意到此問題，所以銀翹解毒丸、銀翹解毒片等成藥只檢出咖啡酸，而連翹酯苷A可能在加工過程中已發生了水解。因此現有技術為避免連翹酯苷A的水解，均要控制溫度，避免接觸強酸強堿，這在很大程度上，局限了連翹酯苷A的提取工藝，降低了提取效率。

發明人經過反復研究，總結了一種能夠保持連翹提取物抗菌活性的高溫提取方法，并申請了專利，申請號為200510030815.5。該專利所提的提取物，是一種連翹的總酚類物質，而此類物質的抗菌抗病毒活性比連翹酯苷A遜色，但是可以通過對連翹總酚類提取物進行純化分離，進而得到大量的連翹酯苷A。

發明內容

本發明的目的就是提供一種從連翹提取物，主要是連翹總酚類物質中進一步分離純化得到連翹酯苷A的方法。

本發明是從連翹總酚類物質中純化出連翹酯苷A的方法。連翹總酚類物質的獲得可以有很多方法，比如：

熱提法：用水提取連翹原材料，濾過，減壓濃縮，加入硅藻土攪拌；再用70-80％乙醇超聲提取晾干后的硅藻土，合并醇提液，或用70-80％乙醇及水洗脫；上大孔樹脂，水洗脫、乙醇解吸附，收集乙醇溶液，減壓濃縮，得連翹提取物。

冷提法：用8倍50％甲醇冷浸連翹原材料，過夜，超聲提取20min，收集醇溶液，減壓干燥，即得連翹提取物。

所說的連翹原材料是包括連翹的果實、葉子、種子等連翹植物的一部分或全部。

實現本發明的技術方案為：將連翹提取物上粗硅膠柱，用乙酸乙酯-丙酮-水或乙酸乙酯-C1-C5低級醇-水或氯仿-C1-C5低級醇-水為流動相進行洗脫，比例為9-1∶0.5-5∶5-0.5，收集流份，減壓濃縮至干，殘渣經薄層硅膠柱層析，以乙酸乙酯-丙酮-水或乙酸乙酯-C1-C5低級醇-水或氯仿-C1-C5低級醇-水為流動相洗脫，比例為9-1∶0.5-5∶5-0.5，收集流份，減壓濃縮至干，殘渣再經反相硅膠柱純化，甲醇-水洗脫，比例為1-4∶6-9，收集流份，減壓濃縮至干，真空干燥即得。

優選地，本發明的技術方案為：將連翹提取物上粗硅膠柱，用流動相乙酸乙酯-丙酮-水為流動相進行洗脫，比例為8∶2∶0.5，收集流份，減壓濃縮至干，殘渣經薄層硅膠柱層析，以流動相乙酸乙酯-丙酮-水為流動相進行洗脫，比例為8∶2∶0.5，收集流份，減壓濃縮至干，殘渣再經反相硅膠柱純化，甲醇-水洗脫，比例為3∶7，收集流份，減壓濃縮至干，真空干燥即得。

發明的優點：1.提取的效率大大提高，能，夠更好地節約利用原材料，得到高純度的連翹酯苷A；2.進行連翹原材料的復方提取；3.不用受到現有技術所說的必需“控制溫度”的限制。

附圖說明

連翹酯苷A純度檢測高效液相色譜圖

具體實施方式

實施例1