[發明專利]一種嗜熱α－淀粉酶的制備純化方法有效
| 申請號： | 200610025974.0 | 申請日： | 2006-04-24 |
| 公開（公告）號： | CN101063115A | 公開（公告）日： | 2007-10-31 |
| 發明（設計）人： | 張毅;王麗薩;楊勝利 | 申請（專利權）人： | 中國科學院上海生命科學研究院 |
| 主分類號： | C12N9/28 | 分類號： | C12N9/28;C12P19/14;C12P19/02 |
| 代理公司： | 上海專利商標事務所有限公司 | 代理人： | 徐迅 |
| 地址： | 20003*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 淀粉酶 制備 純化 方法 | ||
1.一種嗜熱α-淀粉酶的制備方法，其特征在于，它包括步驟：
(1)將嗜熱α-淀粉酶的包涵體在70-100℃的溫度下，在pH?9.5-12的堿性溶液中溶解變性，從而獲得嗜熱α-淀粉酶的變性溶液；
(2)將步驟(1)中獲得的嗜熱α-淀粉酶的變性溶液進行復性，從而獲得嗜熱α-淀粉酶的復性溶液；
(3)從步驟(2)得到的嗜熱α-淀粉酶的復性溶液分離出嗜熱α-淀粉酶；
所述的嗜熱α-淀粉酶是選自下組的嗜熱α-淀粉酶：嗜熱古菌Pyrococcusfuriosus的嗜熱α-淀粉酶、沃氏火球菌Pyrococcus?woesei的嗜熱α-淀粉酶。
2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中所述的堿性溶液為pH9.5-12.0的緩沖液。
3.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中的堿性溶液溫度為75-95℃。
4.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟(1)中，變性處理時間為1-20分鐘。
5.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟(2)中，復性條件是在15-70℃下，于pH7.5-9.5的緩沖液復性0.5-20小時。
6.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟(3)中，所述的分離是通過以下方法進行：疏水層析、離子交換層析、分子排阻層析或其組合。
7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，還包括步驟：
(4)將分離的嗜熱α-淀粉酶凍干，制得嗜熱α-淀粉酶凍干劑。
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