[發明專利]鹽生杜氏藻3－磷酸甘油脫氫酶同工酶及其制備方法與應用無效
| 申請號： | 200610021865.1 | 申請日： | 2006-09-15 |
| 公開（公告）號： | CN101144089A | 公開（公告）日： | 2008-03-19 |
| 發明（設計）人： | 曹毅;喬代蓉;白林含;徐輝;孫曉菲;黃非;李世林 | 申請（專利權）人： | 四川大學 |
| 主分類號： | C12N15/53 | 分類號： | C12N15/53;C12N9/04;C12N15/10;C12N15/82;C12P7/20 |
| 代理公司： | 成都科海專利事務有限責任公司 | 代理人： | 黃幼陵 |
| 地址： | 610065四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 鹽生杜氏藻 磷酸 甘油 脫氫酶 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶基因，其特征在于它具有序列表中SEQID?NO.1所述的核苷酸序列。
2.一種鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶基因的重組質粒，其特征在于含有權利要求1所述的核苷酸序列。
3.一種鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶，其特征在于它由權利要求2所述的重組質粒表達而成，具有序列表中SEQ?ID?NO.2所述的氨基酸序列。
4.一種權利要求1所述的鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶基因的制備方法，其特征在于以鹽生杜氏藻為原料，依次包括以下步驟：
(1)鹽生杜氏藻總RNA的提取與mRNA的分離；
(2)鹽生杜氏藻cDNA文庫的構建；
(3)鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶基因的全長克隆、測序。
5.一種權利要求2所述鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶基因的重組質粒的制備方法，其特征在于依次包括以下步驟：
(1)按照權利要求4所述方法制備鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶基因；
(2)將步驟(1)所制備的鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶基因片段克隆至中間載體，再通過引入的酶切位點，亞克隆至表達載體，即形成重組質粒。
6.一種權利要求2所述鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶基因的重組質粒的制備方法，其特征在于依次包括以下步驟：
(1)按照權利要求4所述方法制備鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶基因；
(2)將步驟(1)所制備的鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶基因片段克隆至表達載體，即形成重組質粒。
7.一種權利要求3所述鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶的制備方法，其特征在于依次包括以下步驟：
(1)按照權利要求4所述方法制備鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶基因；
(2)將步驟(1)所制備的鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶基因片段克隆至原核表達載體，即形成重組質粒，將其轉入大腸桿菌中進行原核表達。
(3)通過Ni親和純化柱純化獲得重組的鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶。
8.權利要求3所述鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶在培育耐鹽農作物中的應用。
9.權利要求3所述鹽生杜氏藻3-磷酸甘油脫氫酶同工酶在制備甘油中的應用。
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