[發(fā)明專利]血液淋巴細(xì)胞中子宮內(nèi)膜異位癥的分子診斷標(biāo)志物的鑒定

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200580048449.4
• 申請日: 2005-12-09
• 公開（公告）號: CN101124340A
• 公開（公告）日: 2008-02-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 伊達(dá)哈里茲·弗洛里斯;斯皮羅·莫薩斯;埃斯特爾·羅森布盧姆
• 申請（專利權(quán)）人: 美國政府健康及人類服務(wù)部;龐塞醫(yī)學(xué)院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 王達(dá)佐;韓克飛

相關(guān)申請

本申請要求于2005年2月18日提交的美國60/654,331號臨時申請的權(quán)益，在此通過引用的方式將該申請整體并入。

發(fā)明領(lǐng)域

使用DNA微陣列鑒定的基因目標(biāo)對子宮內(nèi)膜異位癥患者外周血白細(xì)胞的基因表達(dá)模式的分析，用于對所述疾病的非侵入式診斷測定。

發(fā)明背景

子宮內(nèi)膜異位癥是一種相當(dāng)普遍的婦科疾病，影響多達(dá)10％的育齡婦女(Mahmood，T.A.and?Templeton，A.1991?Hum?Reprod6：544-549)。子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機(jī)理仍然不清楚，并且對子宮內(nèi)膜異位癥損害的建立、發(fā)展及遷移到盆外位置的機(jī)理也還沒有充分理解(Witz，C.A.et?al.2003?Hum?Fertil?6：34-40)。子宮內(nèi)膜異位癥的診斷通常是通過腹腔鏡對盆腔進(jìn)行視覺檢查(Attaran，M.et?al.2002?Cleve?ClinJ?Med?69：647-653)。這種診斷方法依賴于外科醫(yī)生的專業(yè)技術(shù)因此本質(zhì)上是不精確的。另外，腹腔鏡方法的侵入性及與之關(guān)聯(lián)的疾病排除了其用于監(jiān)控疾病的復(fù)發(fā)及對治療的響應(yīng)。盡管迫切需要診斷子宮內(nèi)膜異位癥的非手術(shù)方法及用于預(yù)后及治療監(jiān)控的非侵入式手段，目前仍然沒有基于血液中標(biāo)志物鑒定的特異性實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)(Falcone，T.andMascha，E.2003Fertil?Steril?80：886-888)。此外，那些遭受長期劇烈痛苦、不育及精神痛苦的患病婦女沒有多少治療選擇，這些治療方式都不能治愈該病。尋找用以建立子宮內(nèi)膜異位癥特異性檢驗(yàn)的候選基因被證明很有挑戰(zhàn)性。因此，我們決定應(yīng)用DNA微陣列技術(shù)來加速鑒定子宮內(nèi)膜異位癥的分子生物標(biāo)志物。

DNA微陣列日益被用于鑒定與諸如癌癥、糖尿病和心血管疾病等復(fù)雜基因疾病相關(guān)的基因表達(dá)譜(Hughes，T.R.and?Shoemaker，D.D.2001?Curr?Opin?Chem?Biol?5：21-25)。這種有效的技術(shù)揭示了基因表達(dá)中的疾病特異模式，因此加速了候選基因的鑒別(Albertson，D.G.andPinkel，D.2003?Hum?Mol?Genet?12：R145-52)。迄今為止，關(guān)于用DNA微陣列來發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)基因只有5篇報道。所有5項(xiàng)研究都將腹腔鏡手術(shù)中得到子宮內(nèi)膜異位組織的基因表達(dá)譜與正常的子宮內(nèi)膜比較，但分別關(guān)注該病的不同方面(即不育、深部子宮內(nèi)膜異位及卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫)。在Eyster等人(2002)的一項(xiàng)研究中，所分析的4,133個基因中的8個與對比的子宮內(nèi)膜相比在子宮內(nèi)膜異位囊腫中顯示過表達(dá)(Eyster，K.M.et?al.2002?Fertil?Steril?77：38-42)。過表達(dá)的基因是細(xì)胞骨架元件(波形蛋白、β-肌動蛋白及α-2-肌動蛋白)，管家基因(40S核糖體蛋白S23)或免疫相關(guān)蛋白(Igγ輕鏈、Ig胚系H鏈、補(bǔ)體、主要組織相容性復(fù)合體I類)。作者提出諸如波形蛋白的細(xì)胞骨架蛋白的表達(dá)水平提高能夠解釋子宮內(nèi)膜異位細(xì)胞的侵入潛力，以及免疫細(xì)胞滲透進(jìn)子宮內(nèi)膜移植物能夠說明所觀察到的免疫球蛋白基因的過表達(dá)。Arimoto等人(2003)也應(yīng)用DNA微陣列來鑒定卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫的基因表達(dá)譜(Arimoto，T.et?al.2003Int?J?Oncol?22：551-560)。子宮內(nèi)膜囊腫中顯示上調(diào)節(jié)的基因包括HLA抗原，補(bǔ)體因子，核糖體蛋白及轉(zhuǎn)化生長因子B1(TGFBI)。下調(diào)節(jié)的基因包括TP53、生長停滯及DNA損傷誘導(dǎo)蛋白(GADD34、GADD45A及GADD45B)、p53誘導(dǎo)的蛋白(PIG11)以及輸卵管糖蛋白(OVGP1)。Lebovic及其同事(2002)比較了在子宮內(nèi)膜異位中被IL-1β誘導(dǎo)的597個人類基因與正常的子宮內(nèi)膜活組織檢查的基因表達(dá)水平(Lebovic，D.I.et?al.2002?FertilSteril?78：849-854)。他們觀察到細(xì)胞周期調(diào)節(jié)基因Tob-1在異位的基質(zhì)細(xì)胞中被IL-1β下調(diào)節(jié)，并且提出抑制該基因的表達(dá)可能促進(jìn)子宮內(nèi)膜異位細(xì)胞的生長。Kao等人(2003)用DNA微陣列分析與子宮內(nèi)膜異位相關(guān)的不育癥的分子基礎(chǔ)(Kao，L.C.et?al.2003?Endocrinology144：2870-2881)。在植入的時間窗口期間在正常子宮內(nèi)膜中通常上表達(dá)，但在子宮內(nèi)膜異位癥中被發(fā)現(xiàn)下降的基因包括IL-15(NK細(xì)胞增殖及功能的強(qiáng)促進(jìn)因子)、補(bǔ)體4結(jié)合蛋白(C4BP；其可能通過與LRP5相互作用而干擾Wnt信號傳導(dǎo))及glycodelin(其受孕酮調(diào)節(jié)且被認(rèn)為干擾受精)。最后，最近發(fā)現(xiàn)深部子宮內(nèi)膜異位損害具有增加的血小板衍生生長因子受體α(PDGFRA)、蛋白激酶Cβ1(PKCβ1)及janus激酶1(JAK1)的表達(dá)，提供了RAS/RAF?IMAPK途徑參與子宮內(nèi)膜異位癥的病理生理學(xué)的證據(jù)(Matsuzaki，S.et?al.2004?Mol?Hum?Reprod10：719-728)。