[發(fā)明專利]利用發(fā)光體K－37的脂蛋白測定

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200580047864.8
• 申請日: 2005-12-12
• 公開（公告）號: CN101133329A
• 公開（公告）日: 2008-02-27
• 發(fā)明（設計）人: 加雷斯·羅伊斯頓·瓊斯;戴維·托馬斯·克拉克
• 申請（專利權）人: 科學技術設備委員會
• 主分類號: G01N33/92
• 分類號: G01N33/92;G01N35/00;G01N21/64
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司
• 代理人: 王旭

1.確定樣品溶液中總脂蛋白濃度的方法，所述方法包含下列步驟：-

(i)將0.2mM-1.0mM探針物質K-37(此處定義)加入到樣品的第一等分部分，所述探針物質結合樣品中的脂蛋白，并且當其如此結合時在適當激發(fā)下發(fā)熒光；和

(ii)利用熒光分析確定樣品中總脂蛋白濃度。

2.根據權利要求1的方法，其中加入到第一等分部分的K-37濃度在大約0.5-0.85mM之間。

3.根據權利要求1或2的方法，其中所述方法包含將配體結合抑制劑加入到第一等分部分，所述配體結合抑制劑適合于基本上抑制所述探針物質與人血清白蛋白上的疏水性結合域的結合，之后確定脂蛋白或HDL濃度。

4.根據權利要求3的方法，其中所述配體結合抑制劑包含脂肪酸或其功能衍生物。

5.根據權利要求3或權利要求4的方法，其中所述配體結合抑制劑包含辛酸(C₈)或其衍生物，例如，辛酸鹽(酯)。

6.根據前述權利要求任一項的方法，其中，對于每個步驟，通過在400nm-650nm的激發(fā)波長激發(fā)第一等分部分來誘導熒光，并且在約540nm-700nm之間的發(fā)射波長測量得到的熒光。

7.根據前述權利要求任一項的方法，其中所述方法還包含確定脂蛋白特定類別或亞類濃度的步驟。

8.根據權利要求7的方法，其中將第二探針物質加入到樣品的第二等分部分；其中第二探針結合脂蛋白的特定類別或亞類，以致當與它們結合時所述第二探針在適當激發(fā)之下改變熒光產率；并且該熒光指示脂蛋白特定類別或亞類的濃度。

9.根據權利要求8的方法，其中脂蛋白的類別或亞類是HDL。

10.根據權利要求9的方法，其中第二探針物質是尼羅紅。

11.根據權利要求10的方法，其中加入到樣品的探針物質尼羅紅的濃度在大約0.1-0.9mM之間。

12.根據權利要求8-11任何一項的方法，其中將根據權利要求5-7任何一項的配體結合抑制劑加入到第二等分部分。

13.根據權利要求8-12任何一項的方法，其中將封閉HSA藥物結合域的試劑也加入到第二等分部分，之后確定HDL濃度。

14.根據權利要求13的方法，其中所述試劑是苯甲酸或其鹽或衍生物。

15.根據權利要求10-14任何一項的方法，其中通過在400nm-650nm之間的激發(fā)波長激發(fā)第二等分部分并且在約540nm-700nm之間的發(fā)射波長測量得到的熒光來誘導熒光。

16.根據權利要求10-15任何一項的方法，其中通過在400nm-500nm之間的激發(fā)波長激發(fā)第一等分部分；在約600nm的激發(fā)波長激發(fā)第二等分部分；并且在約620nm的發(fā)射波長測量從每個等分部分得到的熒光來誘導熒光。

17.根據前述權利要求任一項的方法，其中所述樣品是生物流體。

18.根據前述權利要求任一項的方法，其中所述樣品包含血漿或血清，或淋巴。

19.一種裝置，用于進行根據權利要求1-18任何一項的脂蛋白測定，所述裝置包含：反應儲器；適合于含有根據權利要求1-18任何一項方法所需試劑的容納裝置；可操作用于激發(fā)所述樣品以便它發(fā)熒光的激發(fā)裝置，和可操作用于檢測由所述樣品發(fā)射的熒光的檢測裝置。

20.根據權利要求19的裝置，其中所述裝置包含閱讀器和盒，所述盒包含所述反應儲器和所述容納裝置。

21.根據權利要求19或20的裝置，其中所述激發(fā)裝置包含照明源，可操作用于在大約460nm并且也任選在600nm照亮所述樣品。

22.根據權利要求19-21任何一項的裝置，其中所述檢測裝置在大約500nm-700nm檢測由樣品發(fā)射的熒光。