[發明專利]多肽鏈多亞基蛋白質的復合表達

無效

• 申請號: 200580045813.1
• 申請日: 2005-10-11
• 公開（公告）號: CN101120092A
• 公開（公告）日: 2008-02-06
• 發明（設計）人: 馬延高;馬向東
• 申請（專利權）人: 基諾藥業有限公司
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;C12N15/17;C12N15/63;C12N15/64;C12N5/10;C07H21/04;C12P21/00;C12P21/02;C12P21/04;A61K47/06;A61K38/28;A61K38/19;A61K38/16
• 代理公司: 北京康信知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 章社杲;李丙林

1.一種重組遺傳結構，用于表達具有在天然生產中通過翻譯后形成的至少兩條鏈的目標蛋白，所述重組遺傳結構包括至少兩個表達盒，每一個表達盒包括對應于所述目標蛋白一條鏈的序列，其中，所述重組遺傳結構的翻譯在不需要如天然生產一樣的翻譯后酶切的情況下表達所述目標蛋白。

2.根據權利要求1所述的重組遺傳結構，其中所述目標蛋白是哺乳動物蛋白質。

3.根據權利要求1所述的重組遺傳結構，其中所述目標蛋白包括胰島素分子。

4.根據權利要求1所述的重組遺傳結構，其中所述至少兩個表達盒是緊密相鄰的。

5.根據權利要求1所述的重組遺傳結構，其中所述至少兩個表達盒都包含相同的5’端調控區。

6.根據權利要求1所述的重組遺傳結構，其中所述至少兩個表達盒都包含彼此相同的5’端調控區，以及彼此不相同的目標蛋白亞基的DNA序列。

7.根據權利要求1所述的重組遺傳結構，其中所述至少兩個表達盒都有相同的引導序列。

8.根據權利要求1所述的重組遺傳結構，其中第一個表達盒包含可操作地連接于第一引導序列的編碼目標蛋白的第一條鏈的序列，第二個表達盒包含可操作地連接于第二引導序列的編碼目標蛋白的第二條鏈的序列，這兩個引導序列則能夠誘導各自的表達盒所表達的產物進入自然的分泌途徑。

9.根據權利要求8所述的重組遺傳結構，其中所述第一條鏈與所述第二條鏈是不同的。

10.根據權利要求1所述的重組遺傳結構，包含如下序列：

Pm₁-Ld₁-Pt₁-Y₁-Tm₁-Pm₂-Ld₂-Pt₂-Y₂-Tm₂

其中每個列出元件可操作地連接于相鄰的元件，Pm代表啟動子序列；Ld代表引導序列；Pt代表蛋白酶識別序列；Y₁和Y₂則分別代表目標蛋白的不同的鏈各自的序列；Tm則代表終止序列。

11.根據權利要求10所述的重組遺傳結構，其中Pm₁和Pm₂基本上是相同的，Ld₁和Ld₂基本上是相同的，Pt₁和Pt₂基本上是相同的，Pt₁和Pt₂基本上是相同的，Tm₁和Tm₂基本上是相同的。

12.根據權利要求1所述的重組遺傳結構，包括DNA。

13.根據權利要求1所述的重組遺傳結構，包括RNA。

14.由權利要求1所述的重組遺傳結構表達的是蛋白質。

15.一種細胞包括用于表達在自然生產中具有通過翻譯后剪切形成的至少兩條鏈的目標蛋白，一種重組遺傳結構包括至少兩個表達盒，其中每一個表達盒基本上與所述目標蛋白的一條肽鏈相對應，并且所述細胞通過所述重組遺傳結構在沒有所述目標蛋白的天然生產過程中所需的翻譯后剪切的情況下能夠表達具有生物活性的目標蛋白質。

16.根據權利要求15所述的細胞，其中所述細胞是一種真核細胞。

17.根據權利要求15所述的細胞，其中所述細胞是一種酵母細胞。

18.根據權利要求15所述的細胞是選自pichia，Hansenula、Candida和Toralopsis等酵母菌株。