[發明專利]抗體文庫篩選的方法

無效

• 申請號: 200580034143.3
• 申請日: 2005-10-07
• 公開（公告）號: CN101052879A
• 公開（公告）日: 2007-10-10
• 發明（設計）人: 馬里克·若澤·雅內克·格特魯德·斯塔薩;赫勒爾德·雷厄瑟夫
• 申請（專利權）人: 奧菲技術科學院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京邦信陽專利商標代理有限公司
• 代理人: 黃澤雄;崔華

1.一種篩選分子文庫以鑒別或選擇所述分子文庫中的作為一種或多 種靶體的候選結合伴侶的一種或多種成員的方法，所述方法包括：

(a)使表達文庫與一種或多種靶體接觸；

(b)使所述靶體接受至少一次清洗步驟；

(c)通過貫穿有機相的分離，使與所述表達文庫的一種或多種成員 結合的靶體與所述表達文庫未結合的成員分離，因而從其他文庫成員中 分離所述靶體的候選結合伴侶。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述表達文庫是噬菌 體展示文庫。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述表達文庫是抗體 表達文庫。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述抗體表達文庫包 括scFv抗體。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述靶體是細胞表面 分子或者附著于固相的分子。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述細胞表面分子以 完整細胞的組分或以細胞的膜片段的形式提供。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述靶體為抗原。

8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述細胞被編碼所述 靶體的核酸轉化或轉染，或者被編碼靶體文庫的核酸轉化或轉染，或者 是過量表達所述靶體的細胞。

9.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述細胞為真核細胞。

10.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述細胞與疾病狀態 相關。

11.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述細胞為癌細胞。

12.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述固相為微粒固相。

13.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(a)中提供 了多于一種的靶體。

14.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(b)中進行 至少2次的清洗步驟。

15.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(b)中進行 1、2、3或4次清洗步驟。

16.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，通過離心進行所述貫 穿有機相的分離。

17.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法還包括在所 述方法步驟(a)之前進行的一次或多次預淘洗步驟，其中所述表達文庫 與一種或多種非相關的實體進行接觸。

18.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(a)至(c)被 重復一次或多次。

19.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(a)至(c)被 重復1、2或3次。

20.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，與所述表達文庫的一 種或多種成員結合的所述靶體被進行進一步的分析。

21.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述靶體的候選結合 伴侶被進行進一步分析。

22.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述候選結合伴侶從 所述靶體中被移出、洗脫，或分離，或者獨立于所述靶體被表達或產生。

23.根據權利要求21所述的方法，其特征在于，對所述候選結合伴 侶的所述進一步分析包括如下步驟：

i)使一種或多種所述候選結合伴侶在溶液中與一種或多種靶體接觸；

ii)將與一種或多種所述候選結合伴侶結合的靶體捕獲至固相；以及

iii)檢測靶體的存在，因而檢測靶體的一種或多種候選結合伴侶的存 在。

24.根據權利要求23所述的方法，其特征在于，所述靶體是細胞表 面分子或者附著于固相的分子。