[發明專利]將核酸遞送到外周神經元的方法

無效

• 申請號: 200580021356.2
• 申請日: 2005-01-20
• 公開（公告）號: CN101065488A
• 公開（公告）日: 2007-10-31
• 發明（設計）人: 王朔;王旭
• 申請（專利權）人: 新加坡科技研究局
• 主分類號: C12N15/64
• 分類號: C12N15/64;C12N15/87
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司
• 代理人: 盧素華;鄭霞

發明領域

本發明通常涉及將核酸遞送到外周神經元的組合物和方法。

發明背景

神經再生是一種復雜的生物學過程。中樞和外周神經系統的神經損傷后的變性過程在某些方面是相類似的，但在另外一些方面卻不同。最大的區別之一在于：在神經損傷后，外周神經具有明顯更強的再生軸突能力(Fenrich，K.等.2004，Can?J?Neurol?Sci.31(2)：142)。

Schmidt和Leach最近綜述了治療神經損傷的許多方法(2003，Annu.Rev.Biomed.Eng.5：293)。目前治療損傷導致神經缺陷的方法通常依靠來自病人的供體組織。這帶來了下列問題：供體位置的功能損失、潛在疼痛神經瘤的形成、供體和受體神經結構的不同以及大范圍修復時移植物短缺。為了克服這些問題，已經開發出了合成神經導管(NGCs)，其通過將切斷神經殘端鎖定在該管的兩端來對神經間隙進行橋連(US5,0190,87)。許多裝置，例如，Integra?Neurosciences?I型拼接(collage)管和SaluMedica的SaluBridge^TM神經封套已獲美國食品與藥物管理局批準。然而，這些裝置是用于治療相對較短的神經缺損，并且在大多數情況下，合成管并不具有神經自體移植物的功能(Schmidt?&?Leach2003，Annu.Rev.Biomed.Eng.5：293)。

提出了一些組織-構建方法來提高NGCs的功能，其包括在中空管內遞送神經營養因子。相對于充滿了磷酸緩沖鹽類的NGCs而言，用透析血漿填充的硅酮NGCs使得功能性復原在8周內增加了3-5倍(Williams等.1987，J.Comparative?Neurology?264：284)。作為替代的，在管內傳導神經營養因子如神經生長因子(NGF)、腦源性神經營養因子(BDNF)、成纖維細胞生長因子(FGF)、神經膠質生長因子(GFG)以及睫狀神經營養因子(CNTF)會顯著的加速斷裂及被修補神經的形態和/或功能恢復。

NGF是第一個并且是研究最為透徹的神經-來源的因子，其作用的神經元群的種類相對有限，包括外周神經系統感覺神經元的交感亞群，和腦內的紋狀體(striatial)及膽堿能神經元(Terenghi，G.1999，J.Anat194：1-14)。在正常情況下，NGF呈現出非常低的濃度，但是在實驗性神經損傷動物模型中快速升高。NCF主要是由在損傷神經遠殘端的目標組織和施沃恩細胞來產生的，然后在作用神經元受體產生神經營養功效前以逆向方式運輸入細胞體內。外周神經病中，在病態神經內的此類運輸會受影響、減少或被完全阻斷。盡管在早期NGF的遞送能促進管內的神經再生，但是這種促進不會持續到1個月后，這可能是由于管內NGF濃度的快速降低，造成這種降低的原因在于NGF在37℃含水介質中降解、滲漏出管和/或由于液體進入而被稀釋。此外，將神經營養因子導入NGCs的時間對于愈合或再生過程有著重要的影響：引入各種試劑太早或太晚都會抑制再生過程(US5584885)。

感覺神經元的細胞體位于背根神經節，小結節(nodule)位于每個脊神經的背根遠端。背神經根和腹神經根位于硬膜鞘內并被腦脊液(CSF)包圍，其穿過椎間孔，在其中背根形成了背根神經節，隨后與腹根合在一起形成背神經根。從形態上看，DRG的體感神經元具有一個單極結構，并通過一個脊髓中的長的向上軸突而連接到中樞神經系統(CNS)上，并通過第二軸突分支下行通過脊神經根而連接到外周神經系統(PNS)上，并且進一步突出進入到外周神經中。從功能上說，DRG神經元負責從觸覺、溫度、痛感到本體感受的不同感覺通道的受體-傳導刺激的信號傳導。

發明簡述

本發明的一個方面在于提供了一種將核酸遞送到宿主外周神經系統的神經元細胞中的方法，其包括下述步驟：辨識背根神經節中的目標神經元細胞，然后將包含核酸的載體施用到宿主腦脊液中足夠接近背根神經節的位置，以將核酸遞送到目標神經元細胞的細胞體中。

本發明的另一個方面在于提供了一種治療宿主外周神經病的方法，該方法包括辨識受神經病影響的背根神經節中的目標神經元細胞，然后將包含治療用核酸的載體施用到宿主腦脊液中足夠接近背根神經節的位置，以將核酸遞送到目標神經元細胞的細胞體中。

本發明的又一個方面在于提供了一種治療宿主的斷裂的外圍神經的方法，該外圍神經具有近端和遠端殘端，該方法包括將包含治療用核酸的載體鞘內施用至背根神經節的神經細胞中，其中遠端和近端殘端被鎖定到神經導管上。