[發明專利]遺傳純化的古蘭糖膠

無效

• 申請號: 200580020442.1
• 申請日: 2005-06-20
• 公開（公告）號: CN101124329A
• 公開（公告）日: 2008-02-13
• 發明（設計）人: J·M·克利里;R·J·科爾曼;N·E·哈丁;Y·N·帕特爾
• 申請（專利權）人: CP覬爾科美國股份有限公司
• 主分類號: C12P1/00
• 分類號: C12P1/00;C12P21/06;C12N9/00;C12N9/16
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司
• 代理人: 陶家蓉

本專利文件公開內容的一部分包括受到版權保護的內容。版權所有者不阻止任何 人復制如專利商標局的專利文件或記錄上出現的該專利文件或專利公開內容，但仍 舊保留所有版權。

發明領域

本發明涉及食品添加劑領域。具體涉及乳制品添加劑領域。更具體涉及滅菌的奶 制品添加劑。

發明背景

古蘭糖膠(Gellan?gum)是一種由伊樂藻鞘氨醇單胞菌(SPhingomonas?elodea)產生 的胞外多糖。由伊樂藻鞘氨醇單胞菌(S.elodea)制造的古蘭糖膠可從CP?Kelco(San Diego，CA)作為Kelcogel?LTl00^購得。商業上，古蘭糖膠是通過需氧發酵形成的。 發酵結束后對肉湯巴氏滅菌以殺死活細胞，然后再從發酵肉湯中回收凝膠。

古蘭糖膠包含葡萄糖、葡糖醛酸和鼠李糖，其摩爾比為2∶1∶1，它們連接形成四 糖重復單元。天然古蘭糖膠在同一葡萄糖殘基上被乙?；透视突?glycerylated)。 每個四糖重復單元平均有一個乙?；桶雮€甘油基。

古蘭糖膠的回收方法將影響凝膠的性質。直接回收得到柔軟有彈性的凝膠。古蘭 糖膠由于其結構和流變學特征，已被長期用于經培養、高壓殺菌(retorted)和冷凍的乳 制品。然而，含有古蘭糖膠的乳基產品雖然儲藏穩定，但仍會出現臭味和臭氣；這 種味道和氣味使食品味道變差。已知這種臭味和臭氣與奶中的底物如硫酸對甲酚酯 (para-cresyl?sulfate)和對甲酚基葡糖醛酸(para-cresyl?glucouronide)形成對甲酚有關。在 經過超高溫處理并室溫保存的含有古蘭糖膠的奶基產品中仍可檢測出對甲酚。

在消除該問題的一種努力中，用熱堿處理使古蘭糖膠脫?；?。雖然能有效除去對 甲酚，但脫?；幚硎沟霉盘m糖膠更加易碎而不太適用于某些食品應用。消除該問 題的另一種方法是用變性劑如次氯酸鈉或氫氧化鉀預處理天然古蘭糖膠。這種方法 增加了材料和處理成本。本領域需要一種長期儲藏后不在滅菌乳制品中產生對甲酚 且不需要額外處理步驟的古蘭糖膠產品。

發明概述

在第一個實施方式中，提供了一種基本上不含芳基硫酸酯酶蛋白的含有古蘭糖膠 的組合物。

在第二個實施方式中，提供了一種基本上不含β-葡糖醛酸酶蛋白的含有古蘭糖膠 的組合物。

在本發明的第三個實施方式中，提供了一種基本上不含芳基硫酸酯酶也不含β- 葡糖醛酸酶蛋白的含有古蘭糖膠的組合物。

在本發明的第四個實施方式中，提供了一種制造古蘭糖膠組合物的方法。在培養 基中培養伊樂藻鞘氨醇單胞菌。伊樂藻鞘氨醇單胞菌產生無催化活性的芳基硫酸酯 酶、或無催化活性的β-葡糖醛酸酶、或無催化活性的芳基硫酸酯酶和無催化活性的β- 葡糖醛酸酶。收集培養基。從所述培養基沉淀古蘭糖膠。

本發明的第五個實施方式提供了一種伊樂藻鞘氨醇單胞菌的微生物純培養物。該 培養物是芳基硫酸酯酶缺陷型的。

本發明的第六個實施方式提供了另一種伊樂藻鞘氨醇單胞菌的微生物純的培養 物。該培養物是β-葡糖醛酸酶缺陷型的。

本發明的再一實施方式是一種伊樂藻鞘氨醇單胞菌的微生物純的培養物。所述培 養物同時為芳基硫酸酯酶和β-葡糖醛酸酶缺陷型。

本發明的第八個實施方式提供了一種編碼伊樂藻鞘氨醇單胞菌芳基硫酸酯酶的 分離并純化的多核苷酸。所述芳基硫酸酯酶具有SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列。

本發明的第九個實施方式提供了一種編碼伊樂藻鞘氨醇單胞菌β-葡糖醛酸酶的 分離并純化的多核苷酸。所述β-葡糖醛酸酶具有SEQ?ID?NO：5所示的氨基酸序列。

本發明的第十個實施方式是一種包含伊樂藻鞘氨醇單胞菌基因組DNA的分離并 純化的多核苷酸。所述基因組DNA缺失其全部或部分芳基硫酸酯酶編碼序列。

本發明的第十一個實施方式是一種包含伊樂藻鞘氨醇單胞菌基因組DNA的分離 并純化的多核苷酸。所述基因組DNA缺失其全部或部分β-葡糖醛酸酶編碼序列。

下面具體描述的本發明的這些和其它實施方式為本領域提供了一種制造更易為 消費者接受的滅菌的含有古蘭糖膠的乳制品的方法。

附圖簡述