[發(fā)明專利]檢測DNA點突變的方法（SNP分析）和相關的裝置

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200480021969.1
• 申請日: 2004-05-28
• 公開（公告）號: CN101094923A
• 公開（公告）日: 2007-12-26
• 發(fā)明（設計）人: 沃爾特·岡布雷赫特;彼得·波里卡;曼弗雷德·斯坦?jié)蔂?/a>
• 申請（專利權）人: 西門子公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12P19/34
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所
• 代理人: 巫肖南;封新琴

1.一種用于檢測DNA點突變(SNP分析)的方法，其中利用待測目標DNA與在DNA芯片上位置特異性固定的捕手DNA的結合(雜交)，其中進行限定的時間過程，具有以下步驟：

a)以已調整的流速將洗滌溶液導引到DNA芯片上，

b)按規(guī)定改變雜交位置上的溫度，

c)溫度依賴性地熔解捕手/目標DNA雜交體并通過流動的洗滌溶液將捕手/目標DNA雜交體從雜交位置上移開，

d)在預定時間間隔內將流速調整為零，

e)在當前溫度下位置特異性地檢測已結合的目標DNA，而對結合的目標DNA的位置特異性檢測通過“未被洗掉的”洗滌溶液進行，

f)根據(jù)預定程序評估信號。

2.根據(jù)權利要求1的方法，其特征在于，多次重復步驟a)到e)。

3.根據(jù)權利要求1或2的方法，其特征在于，溫度變化在于持續(xù)不斷的升高。

4.根據(jù)權利要求3的方法，其特征在于，持續(xù)不斷的溫度升高作為時間的函數(shù)是線性的。

5.根據(jù)權利要求4的方法，其特征在于，持續(xù)不斷的溫度升高以帶有保持時間的斜面作為時間的函數(shù)進行。

6.根據(jù)權利要求5的方法，其特征在于，在保持時間中在DNA芯片上的液流被停止。

7.根據(jù)上述任何一項權利要求的方法，其特征在于，對已結合的目標DNA的檢測是以無標記(無標記物)的形式進行的。

8.根據(jù)權利要求9的方法，其特征在于，無標記檢測以光學形式進行。

9.根據(jù)權利要求8的方法，其特征在于，光學檢測利用DNA雙鏈熔解期間UV吸收的內在變化。

10.根據(jù)權利要求7的方法，其特征在于，無標記檢測以電學方式進行。

11.根據(jù)權利要求7的方法，其特征在于，無標記檢測借助內在的鳥嘌呤氧化進行。

12.根據(jù)權利要求10的方法，其特征在于，利用電化學阻抗方法進行無標記檢測。

13.根據(jù)權利要求7的方法，其特征在于，以重量測量的方式進行無標記檢測。

14.根據(jù)權利要求1到5的任何一個的方法，其特征在于，在利用標記(標記物)的情況下進行已結合的目標DNA的檢測。

15.根據(jù)權利要求14的方法，其特征在于，借助光學標記進行檢測。

16.根據(jù)權利要求14的方法，其特征在于，借助磁性標記進行檢測。

17.根據(jù)權利要求16的方法，其特征在于，借助酶標記進行檢測。

18.根據(jù)權利要求17的方法，其特征在于，所述洗滌溶液含有酶底物。

19.根據(jù)權利要求18的方法，其特征在于，所述酶在所使用的溫度范圍是穩(wěn)定的(有活性的)。

20.根據(jù)權利要求16到19的方法，其特征在于，所述酶標記催化的反應是光學可檢測的。

21.根據(jù)權利要求16到19的方法，其特征在于，所述酶標記催化的反應是電化學可檢測的。

22.根據(jù)權利要求21的方法，其特征在于，在電化學檢測方法中涉及利用氧化還原循環(huán)進行加強的電流測量。

23.根據(jù)權利要求16到19的方法，其特征在于，檢測和評估底物或產(chǎn)物濃度的改變。

24.根據(jù)上述任何一項權利要求的方法，其特征在于，傳感器信號(檢測信號)的評估和顯示作為溫度的函數(shù)進行。

25.根據(jù)權利要求24的方法，其特征在于，在確定的溫度上進行熔解曲線的標準化。

26.根據(jù)上述任何一項權利要求的方法，其特征在于，所述評估是計算機控制的。

27.根據(jù)權利要求26的方法，其特征在于，所述評估是根據(jù)軟件進行的。