[發(fā)明專利]新穎的免疫調(diào)節(jié)肽

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200480019000.0
• 申請日: 2004-05-14
• 公開（公告）號: CN101410130A
• 公開（公告）日: 2009-04-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: L·斯坦曼;H·加倫;P·馮杜拉
• 申請（專利權(quán)）人: 利蘭·斯坦福青年大學(xué)托管委員會;貝希爾治療學(xué)股份有限公司
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;A61P9/10;A61P37/02;G01N33/53
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司
• 代理人: 范 征

免疫應(yīng)答錯(cuò)誤靶向機(jī)體的健康細(xì)胞和/或組織導(dǎo)致自身免疫疾病。自身免疫疾 病的特征在于T和B淋巴細(xì)胞與自身分子(包括多肽、核酸、小的核顆粒等)反應(yīng)。 自身免疫疾病包括影響特定組織的疾病以及影響多種組織的疾病，這部分取決于自 身抗原的分布。

Nogo蛋白質(zhì)是Reticulon{RTN}家族的一員，而Reticulon{RTN}家族是近 年被鑒定為中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)髓鞘特異性的主要髓鞘結(jié)合的軸突再生長抑制 劑(Chen?2000，GrandPré?2000)。Nogo-A是nogo基因產(chǎn)生的三種交替轉(zhuǎn)錄物中 最長的，其具有1,163個(gè)氨基酸殘基并對CNS特異。所有這三種同種型在它們 的C-末端含有賦予其大部分抑制能力的預(yù)計(jì)的66個(gè)氨基酸的胞外環(huán)。這個(gè)稱 為Nogo-66的胞外環(huán)通過與Nogo受體和p75輔助受體相互作用而發(fā)揮作用并 通過拮抗經(jīng)由RhoA和Rac1的胞內(nèi)信號傳導(dǎo)來介導(dǎo)軸突生長抑制(Fournier 2001，Brittis?2001，Wang?2002a，，Niederost?2002)。

其它也涉及軸突再生長抑制的髓鞘蛋白，例如髓鞘結(jié)合糖蛋白(MAG)和少突 膠質(zhì)細(xì)胞-髓鞘糖蛋白，也經(jīng)由Nogo受體系統(tǒng)的信號傳導(dǎo)而起作用(Liu?2002， Wang?2002b)。

幾種以改善軸突再生為目的的治療方案試圖阻斷Nogo-Nogo受體系統(tǒng)的 相互作用(Karim?2001)。這些方案包括使用能識別Nogo-A的重組單克隆抗體 IN-1(Merkler?2000，Brosamle?2000)、Nogo受體拮抗肽NEP?1-40(GrandPré2002) 和截短的可溶性Nogo受體(Fournier?2002)。近來，研究者創(chuàng)立了不同的Nogo 敲除小鼠模型，這些模型在增加軸突再生能力上的結(jié)果互相矛盾(Simonen 2003，Zheng?2003，Kim?2003)。其它小組尋找通過誘導(dǎo)抗髓鞘結(jié)合的軸突生長 抑制劑(Huang?1999)或特異性抗Nogo-A衍生的肽472(Hauben?2001)的免疫應(yīng)答 來提高軸突再生長，該項(xiàng)研究由于產(chǎn)生了抗尚未闡明髓鞘成分的抗體應(yīng)答或抗 p472的T-細(xì)胞特異性應(yīng)答而取得適度的成功。

實(shí)驗(yàn)性自身免疫腦脊髓炎(EAE)是一種被深入研究的動物模型，該模型已 成為了解人類疾病-多發(fā)性硬化癥(MS)的病理生理學(xué)和治療資料的來源 (Steinman?2002，Steinman?1999)。EAE主要由協(xié)調(diào)針對CNS的免疫攻擊的髓鞘 -抗原特異性的T細(xì)胞應(yīng)答所介導(dǎo)(Steinman和Zamvil?1990)。雖然靶向髓鞘少 突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(MOG)的抗體被認(rèn)為在EAE和MS中是致病性的并且檢測到 其它抗髓鞘抗體(Genain?1999，Steinman?1996)，但B細(xì)胞應(yīng)答在EAE和MS 中的作用還不清楚。誘發(fā)活動性EAE后發(fā)生B細(xì)胞應(yīng)答的表位擴(kuò)散并且與慢 性疾病模型中復(fù)發(fā)率相關(guān)。近些年，軸突病理學(xué)認(rèn)為MS中神經(jīng)缺陷是主要決 定因素(Trapp?1998)，這導(dǎo)致一種觀點(diǎn)，即通過阻斷軸突再生抑制劑的作用也可 能對該疾病有益處。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種治療或防止脫髓鞘疾病的方法。本發(fā)明的另 一個(gè)目的是提供一種治療或防止自身免疫疾病但總體上不損害免疫系統(tǒng)的特 異性方法。本發(fā)明的這些和其它目的可從整個(gè)說明書中得到了解。

發(fā)明概述

本發(fā)明提供了在診斷和治療自身免疫疾病中使用Nogo表位片段(特別是Nogo 多肽)的組合物和方法。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)施用Nogo表位片段(特別是Nogo肽45-66)可調(diào) 節(jié)脫髓鞘性自身免疫疾病中免疫應(yīng)答。Nogo表位片段可用于治療炎性中樞神經(jīng)系 統(tǒng)疾病產(chǎn)生保護(hù)性免疫應(yīng)答。Nogo表位可作為肽。DNA疫苗等施用。提供保護(hù)性 免疫應(yīng)答的Nogo片段是特別感興趣的，包括(不限于)存在于Nogo-A蛋白質(zhì)的胞 外66個(gè)氨基酸環(huán)中的肽。

附圖簡述

圖1A.與野生型C57BL/6對照相比，疾病嚴(yán)重性上具有非統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著地下 降的Nogo?KO小鼠。圖1B.死亡率降低的Nogo?KO小鼠(圖1B)。

圖2.針對免疫抗原的T細(xì)胞增殖應(yīng)答的評價(jià)。

圖3A和3B.用Nogo-66肽免疫接種后的結(jié)果。圖3C.對其它髓鞘肽和蛋白質(zhì) 的抗體應(yīng)答的分子內(nèi)和分子間擴(kuò)散。

圖4.Nogo免疫接種產(chǎn)生了對其它髓鞘自身抗原不顯示交叉反應(yīng)性的特異性T 細(xì)胞應(yīng)答。