[其他]由原生質(zhì)體再生稻株的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 101986000003448
• 申請日: 1986-05-21
• 公開（公告）號: CN86103448B
• 公開（公告）日: 1988-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 藤村達(dá)人;櫻井基;赤木宏守;根岸友子;広瀨晃
• 申請（專利權(quán)）人: 三井東壓化學(xué)株式會社
• 代理公司: 中國專利代理有限公司
• 代理人: 羅宏

由原生質(zhì)體生成完全的水稻植株的方法。為得到此原生質(zhì)體，由稻種的坯、盾片或坯根衍生出愈傷組織，在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)愈傷組織以形成易放出原生質(zhì)體的細(xì)胞團(tuán)。用原生質(zhì)體釋放酶溶液處理細(xì)胞團(tuán)以得到原生質(zhì)體。然后將原生質(zhì)體培養(yǎng)成愈傷組織，再在分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)此愈傷組織，再生出整株稻。

本發(fā)明涉及一種用所謂原生質(zhì)體法形成稻株的方法。更確切地說，本發(fā)明涉及一種由原生質(zhì)體衍生出愈傷組織，再由它再生出稻株的方法，原生質(zhì)體則來自于由稻種的胚、盾片或胚根產(chǎn)生的愈傷組織。

原生質(zhì)體是植物、細(xì)菌、真菌之類的除去了細(xì)胞壁的細(xì)胞。因為原生質(zhì)體沒有細(xì)胞壁，故易于經(jīng)受人工處理，例如細(xì)胞融合、基因控制、以及人為的體細(xì)胞突變等。于是，如果能由所處理的原生質(zhì)體再生出一個完整的植株，則可能獲得一種植物，它具有野生植物所沒有的優(yōu)點(diǎn)。作為發(fā)展這種所謂的原生質(zhì)體法的第一步，對于所要研究的每個具體的有機(jī)體，都必須建立能夠由原生質(zhì)體再生出完整植株的方法。

對于雙子葉植物，例如煙草，已知有一些方法可用來從原生質(zhì)體中再生出完整的植株。在這方面常用的方法包括將原生質(zhì)體埋置在半固態(tài)的瓊脂培養(yǎng)基中、懸在液體培養(yǎng)基中、或利用喂養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)等各種培養(yǎng)原生質(zhì)體的方法。但是已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這些方法對于水稻原生質(zhì)體的培養(yǎng)是無效的，如果用上述常規(guī)方法之一進(jìn)行水稻原生質(zhì)體的培養(yǎng)，原生質(zhì)體不是死掉就是不能生長。

關(guān)于水稻原生物體的培養(yǎng)技術(shù)已有報導(dǎo)，由缺乏硝酸還原酶的細(xì)胞得到的原生質(zhì)體衍生出愈傷組織（Wakasa et al.，J.plant physiol.117：pp.223-231，1984）。還有報導(dǎo)說，由花粉的愈傷組織得到的原生質(zhì)體衍生出愈傷組織，從它產(chǎn)生出苗（ohno et al.，Japanese Journal of Breeding35：pp.54-55，1985）。但是還未曾有從水稻原生質(zhì)體中再生出完整稻株的報導(dǎo)。

另一方面，很多研究者報導(dǎo)過，由水稻的培養(yǎng)細(xì)胞再生出完整植株（Nishi et al.，Nature 219：pp.508-509，1968）。但是，這些方法沒有利用原生質(zhì)體。另外還發(fā)現(xiàn)，用這些方法由具有高度分化能力的細(xì)胞很難得到原生質(zhì)體。而且原生質(zhì)體難以培養(yǎng)。

于是，如果建立起一種能由原生質(zhì)體再生出完整水稻植株的方法，關(guān)于創(chuàng)造具有優(yōu)異性能的水稻品種的研究就會前進(jìn)一大步。

因此，本發(fā)明的目的是提供一種能夠由原生質(zhì)體再生出完整稻株[稻屬作物，例如亞洲稻（Oryza sativa）、非洲稻（Oryza glaberrima）、多年生稻（Oryza perennis）等等]的方法。

在本發(fā)明的方法中，由水稻種子的胚、盾片或胚根中衍生出第一個愈傷組織，然后將其在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，形成易于釋放出原生質(zhì)的細(xì)胞團(tuán)。此細(xì)胞團(tuán)用釋放原生質(zhì)的酶溶液處理以形成原生質(zhì)體。將原生質(zhì)體培養(yǎng)成第二個愈傷組織，在分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)，再生出完整的植株。

利用本發(fā)明，第一次由原生質(zhì)體再生出一個完整的稻株（屬于稻屬，例如亞洲稻、非洲稻、多年生稻等等）。