[發明專利]給基質提供具有現成的均勻分布的細胞外基質的方法

無效

• 申請號: 02141356.8
• 申請日: 2002-06-04
• 公開（公告）號: CN1400306A
• 公開（公告）日: 2003-03-05
• 發明（設計）人: A·邁爾斯;S·R·伊爾斯利;F·J·馬努扎
• 申請（專利權）人: 貝克頓迪肯森公司
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00;C12M3/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所
• 代理人: 徐迅

1.一種給基質提供現成的均勻分布的胞外基質的方法，其特征在于，包括步驟：

a)將胞外基質組分施涂在基質區域；

b)保溫所述的胞外基質組分，使之聚合；

c)冷凍位于所述基質區域冷凍的該聚合的胞外基質；

d)凍干位于所述基質區域的、冷凍的胞外基質；

e)將凍干的胞外基質升溫到室溫。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述胞外基質組分被保溫足夠時間以便所述胞外基質形成凝膠。

3.如權利要求1所述的方法，其中所述胞外基質組分在升高的溫度下保溫。

4.如權利要求1所述的方法，其中所述胞外基質組分在37℃的溫度保溫

5.如權利要求1所述的方法，其中所述胞外基質組分在有二氧化碳存在下保溫。

6.如權利要求5所述的方法，其中所述二氧化碳的濃度為5％。

7.如權利要求1所述的方法，其中所述聚合的胞外基質在凍干器中冷凍

8.如權利要求1所述的方法，其中所述聚合的胞外基質在溫度低于-30℃的條件下冷凍。

9.如權利要求1所述的方法，其中所述胞外基質組分包含天然的膠原纖維。

10.如權利要求9所述的方法，其中所述胞外基質組分還包含的選自下組的組分：層粘連蛋白，巢蛋白，硫酸乙酰肝素蛋白多糖，生長因子，蛋白酶和它們的混合物。

11.如權利要求1所述的方法，其中所述基質是一種膜材料，它選自多孔膜，蝕刻膜，澆注膜及其組合。

12.如權利要求11所述的方法，其中所述的膜上的孔為約0.5-30ug/cm²插件膜表面。

13.如權利要求1所述的方法，其中基質包含選自下組的天然的或合成的聚合物：纖維素膜，多孔聚碳酸酯，多孔聚四氟乙烯，尼龍膜和網，玻璃濾網，聚對苯二甲酸乙二酯，聚甲基戊烷，聚丙烯，聚乙烯及其組合。

14.一種細胞培養裝置，其特征在于，包含用于細胞生長的表面，所述的表面包被有胞外基質，所述的基質由下列步驟形成；

a)將胞外基質組分施涂在基質區域；

b)保溫所述的胞外基質組分，使之聚合；

c)冷凍位于所述基質區域冷凍的該聚合的胞外基質；

d)凍干位于所述基質區域的、冷凍的胞外基質；

e)將凍干的胞外基質升溫到室溫。

15.如權利要求14所述的裝置，該裝置包含生長培養基。

16.如權利要求15所述的裝置，所述的培養基是DMEM。

17.如權利要求14所述的裝置，其中所述培養裝置還包括選自下組的附加材料：細胞，抗體，酶，受體，生長因子，胞外基質的額外組分，細胞因子，激素，藥物及其混合物。

18.一種細胞培養裝置，其特征在于，包括適合細胞生長的表面；以及位于該表面上的胞外基質包被層，所述的基質包被層包含具有生物活性的蛋白溶液的聚合產物，其中所述基質中殘留流體基本上通過凍干除去。